表达猪瘟病毒E2蛋白重组PRRS病毒基因工程疫苗的构建方法和应用

摘要

本发明提供了一种表达猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组质粒的构建方法，以及根据该重组质粒构建的基因工程疫苗。基于反向遗传操作平台，根据猪瘟石门株和猪瘟兔化弱毒株C株的E2基因，以及高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞致弱疫苗株HuN4‑F112的基因构建了pA‑SM‑E2和pA‑C‑E2这两个重组质粒。转染MARC‑145细胞后，成功拯救出活病毒，并且发现重组病毒(vA‑SM‑E2和vA‑C‑E2)与亲本毒vHuN4‑F112具有相似的病毒学特性。选取vA‑SM‑E2进行了猪体免疫实验，发现其对猪体具有较好的安全性，免疫后可以有效诱导机体产生免疫应答，产生高水平的针对PRRSVN蛋白和CSFV E2蛋白的抗体，是一种良好的基因工程疫苗候选株。