紫花苜蓿Na⁺/H⁺反向转运蛋白基因及其克隆与应用

摘要

本发明涉及紫花苜蓿Na⁺/H⁺反向转运蛋白MsNHX1基因的克隆、重组及耐盐性功能分析与应用，属于分子生物学和生物技术领域。从紫花苜蓿根中提取总RNA，然后将1微克总RNA反转录成cDNA。根据其它植物中的Na⁺/H⁺反向转运蛋白中保守的氨基酸序列，设计一对简并引物，进行常规聚合酶链式反应(PCR)，PCR产物连接到pGEM-T载体上，转化DH5α细胞，进行序列测定。然后进行3′和5′末端快速扩增获得全长的cDNA。进一步构建正义表达载体，转化拟南芥。转基因拟南芥具有较高的耐盐能力。因此，该基因转化苜蓿等双子叶作物，将会提高其耐盐能力，提高其产量和品质，从而可以扩大双子叶植物在盐碱地上的种植面积，产生巨大的经济效益和社会效益。