一种能够生产人神经生长因子的转基因小鼠的制备方法

摘要

本发明公开了一种通过同源重组技术生产转基因小鼠的方法。所述方法通过Cas‑9/CRISPR基因敲入技术，将人NGF基因取代小鼠染色体上的鼠NGF基因，通过繁殖获得带有纯合人NGF基因的基因敲入小鼠，从而获得颌下腺能够分泌人NGF的子代小鼠。较常规的利用正负双筛选同源重组基因打靶技术相比，本发明方法操作简单，只需将3种质粒DNA同时转染小鼠胚胎干细胞或者对小鼠的受精卵进行原核注射就可以，成功率高，可以达到2‑5％，显著高于普通基因打靶技术的0.1％的小鼠胚胎干细胞阳性率。