检测野生型和/或突变的靶DNA序列的方法和试剂盒

摘要

本发明涉及用于从DNA文库中检测第一和/或第二靶DNA序列的方法，不同之处在于突变产生/消除限制性核酸内切酶的限制性位点，包括以下步骤：(a)提供所述DNA文库，其中每个所述DNA序列含有第一序列片段，由所述限制性核酸内切酶切割的基因组DNA的第二序列片段，以及与所述第一序列片段和如果存在的话，所述限制性核酸内切酶的5'悬垂物的结合物反向互补的第三序列片段；(b)通过使用以下各项的PCR扩增DNA序列的所述文库：与所述第一或第二靶序列正链的第二序列片段的3'端区杂交的第一反向引物；与所述第一靶序列反正链的第二序列片段的3'端区杂交的第二正向引物；包含与所述第二靶序列反正链的第三序列片段的5'端区杂交的第一部分和与所述第二靶序列反正链的第二序列片段的3'端区杂交的第二部分的第三正向引物，其中所述第三正向引物的第一部分具有相对于所述第三正向引物总长度的20％～80％的长度；(c)检测步骤(b)中扩增的DNA序列。