一种基于基因组编辑的海水鲆鲽鱼类种质构建方法及应用

摘要

本发明提供一种基于基因组编辑的海水鲆鲽鱼类新种质构建方法。以半滑舌鳎Dmrt1基因为例，通过构建Dmrt1基因的基因组编辑TALEN质粒，在体外转录为mRNA后转移到半滑舌鳎1‑4细胞期的受精卵动物极，将受精卵培育为成鱼，采用PCR方法从中筛选出基因突变的F0代鱼，从而构建出基因定点突变的成鱼。本发明还提供一种培育基因发生定点突变的海水鱼类新种质的方法，是将上述F0代鱼与野生型鱼杂交，得到杂交子代鱼，然后检测出可遗传突变类型的F0代鱼作为父、母本，进行人工繁殖,筛选出基因双位点突变的F1代鱼，进一步杂交后即可获得纯合突变体系F2代鱼。本发明可使鲆鲽鱼类目的基因发生定点突变，为鲆鲽鱼类基因功能研究和新种质创制提供了一种新的方法。