一种以短杆菌生物合成胞外型胆固醇氧化酶及其转化产物胆甾－4－烯－3－酮的方法

摘要

一种以短杆菌生物合成胞外型胆固醇氧化酶及其转化产物胆甾-4-烯-3-酮的方法，属微生物酶工程技术领域。以高产菌DGCDC-82在优化条件下发酵，产酶可达700-1000U/L，纯化后比酶活达30U/mg以上。所得酶蛋白分子量为5万道尔顿，全酶含有辅酶FAD，酶活性中心有半胱氨酸存在。在水相/有机相双相体系中该酶可将胆固醇专一地氧化为胆甾-4-烯-3-酮，转化率达92%，转化反应条件温和，快速。试验表明胆甾烯酮对降低小鼠、家兔的胆固醇、血脂和低密度脂蛋白有明显效果，可应用于开发医用酶法测血液胆固醇的试剂盒，低胆固醇且富含胆甾-4-烯-3-酮的保健型食品，医用胆甾烯酮制剂等产品，以填补国内空白。