抗EGFR单克隆抗体生物学活性检测方法

摘要

本发明提供了一种抗EGFR单克隆抗体生物学活性检测方法，其步骤包括：1)A431细胞复苏、传代；2)准备96孔板单层A431细胞；3)样品和rhEGF的稀释；4)将样品的7个稀释梯度加入到铺有A431细胞的96孔板，加入rhEGF；培养；5)加入甲醛固定；TBS洗板2次；加入TritonX-100，孵育；TBS洗板1次；加入H₂O₂，孵育；TBS洗板1次；加入locking buffer，孵育；6)加入一抗稀释液；孵育过夜；弃去一抗稀释液，TBST洗板4次；加入二抗稀释液，避光孵育；弃去二抗稀释液，TBST洗板3次；7)加入TMB，避光孵育；加入H₂SO₄，终止显色；8)A450nm和A650nm下读数。本发明的方法能够有效、精确地检测抗EGFR单克隆抗体的生物学活性。