一种共表达菊粉外切酶和内切酶的重组毕赤酵母菌株及其构建方法与应用

摘要

本发明公开了一种共表达菊粉外切酶和内切酶的重组毕赤酵母菌株，该菌株命名为巴斯德毕赤酵母(Pichia？pastoris)GS115-INU1-INU2，已于2014年04月16日保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”，保藏编号为CGMCC？No.9050。本发明提供工程菌株是通过表达质粒pPIC9和pPIC9K，将菊粉外切酶基因和菊粉内切酶基因整合入毕赤酵母GS115基因组上，并从中筛选获得。通过甲醇诱导发酵该菌，可同时表达两种菊粉酶，经发酵制备的菊粉酶酶活性可达4211.8U/ml，并且用于水解菊粉产生单糖的反应时间短，转化效率高，使得用酶法生产高果糖浆具有充分的可行性，足以取代传统的高果糖浆的生产方法，具有巨大的应用价值。