单链DNA的不依赖模板的连接

摘要

本发明提供了用于使用例如热稳定的RNA连接酶对线性ssDNA进行改进的不依赖模板的分子内连接(环化)的连接反应混合物、方法和试剂盒，所述线性ssDNA包括变性的gDNA片段或通过RNA的反转录制备的第一链cDNA。使用所改进的连接反应混合物和方法获得的环状ssDNA分子可例如用作如下的模板：用于通过反向PCR、滚环复制、转录来扩增的模板，或者用于大规模平行DNA测序的模板。应用包括，例如：对于诸如人类医学或动物医学、法医学或农业目的用于研究、筛选、医学诊断、治疗诊断、个性化医学治疗或育种的通过qPCR或使用微阵列的基因表达分析；gDNA拷贝数变异的分析；以及特定核酸序列的检测或定量。