解淀粉芽孢杆菌添加前体物发酵法生产抗病毒药物利巴韦林的生产工艺

摘要

一种解淀粉芽孢杆菌添加前体物TCA（1,2,4-三氮唑-3-羧甲酰胺）发酵法生产抗病毒药物利巴韦林的生产工艺。本发明首先构建了一个能在解淀粉芽孢杆菌细胞内稳定复制并高效分泌表达嘌呤核苷磷酸化酶（PNPase）的重组质粒pBSA43-Bs816PNP，并将此质粒转化鸟苷生产菌解淀粉芽孢杆菌TA208，得到一株兼具高效生产鸟苷和高效表达嘌呤核苷磷酸化酶这两种特点基因工程菌RBVM（pBSA43-Bs816PNP）。采用该工程菌，以葡萄糖、酵母膏、豆浓、玉米浆、磷酸二氢钾、硫酸镁、硫酸亚铁和自来水为原料，添加前体物TCA进行发酵，添加前体物几小时后便可在培养基中检测到较高浓度的利巴韦林。本发明具有发酵周期短，产量高，糖苷转化率高，工艺简便，成本低，能耗低，污染小等优点。