重金属胁迫下水稻总蛋白的双向凝胶电泳分离方法

摘要

本发明公开了一种重金属胁迫下水稻总蛋白的双向凝胶电泳分离方法，包括：(a)提取水稻根蛋白粗品，用乙醚和乙醇的混合溶液洗涤，冷冻干燥后溶于裂解液，水浴加热0.5～2小时，离心，取上清液用丙酮沉淀，离心分离沉淀，冷冻干燥；(b)将沉淀溶于增溶液中，用冷丙酮于-20～-15℃沉淀，离心分离沉淀，重复该步骤2～4次后，将沉淀冷冻干燥；(c)将步骤(b)获得的沉淀溶于增溶液中，利用双向凝胶电泳分离。本发明方法通过增加尿素和硫脲等不同强度的表面去垢剂和多种离液剂，再通过添加PVP和乙醇乙醚的洗涤来去除其它杂质，最后还通过分步溶解来获得更纯的蛋白，同时降低蛋白样品的复杂性，得到了高纯度的水稻根总蛋白。