高效表达乳清酸磷酸核糖转移酶和乳清苷酸脱羧酶的重组菌及其构建方法

摘要

本发明公开了一种高效表达乳清酸磷酸核糖转移酶和乳清苷酸脱羧酶的重组菌，其分类命名为大肠埃希氏菌(Escherichia coli)，该菌株已于2011年7月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.5047。本发明还公开了上述重组菌的构建方法和应用。本发明首次将谷氨酸棒杆菌中的乳清酸磷酸核糖转移酶基因OPRTase pyrE和乳清苷酸脱羧酶基因ODCase pyrF在大肠杆菌中高效共表达。IPTG诱导表达重组大肠杆菌，将破碎后收集的粗酶液经Ni柱纯化后，进行酶反应，OPRTase和ODCase的酶活分别为9U/mg和12U/mg蛋白。