一种结核分枝杆菌药敏表型检测方法及其应用

摘要

本发明公开了一种结核分枝杆菌药敏表型检测方法，包含有如下步骤：1）在无菌离心管的管盖内侧加入用甲醇溶解的质量百分浓度为0.2%的刃天青2.5μl-6μl，待甲醇挥发后，将离心管灭菌；2）将待检测的结核分枝杆菌5-50mg接种到7H9-S培养基中；采用比浊法调整菌液浓度，用无菌水或0.9%的生理盐水将菌液浓度调至麦氏比浊1管的浓度，再用7H9-S培养基稀释菌液20倍；3）取稀释后的菌液50-150μ接种到步骤1）所述的离心管中；4）在步骤3）所述的离心管中加入100μl用7H9-S稀释的待检测的抗结核药物溶液,待检测药物浓度为0.01ug/ml-2.5mg/ml；5）将步骤4）所述的离心管盖紧后，于37℃培养6-7天；6）将步骤5）所述的离心管倒置并振荡，待溶液变为蓝色后，37℃培养12-48小时。实验证明，本发明提供的结核分枝杆菌药敏表型检测方法及其在抗结核药物筛选中的应用，方法工作量小，检测时间短，与传统的罗氏培养基药敏检测法比较，准确率高达90%-99%，且生物安全性较好，不会导致结核病的实验室传播，适合大规模的应用，具有很好的应用前景。