以兔膝关节软骨单位为种子细胞,体外构建组织工程软骨的实验方法

摘要

本发明属于组织工程化软骨体外构建的技术领域，具体涉及一种以兔膝关节软骨单位为种子细胞，体外构建组织工程软骨的实验方法。其步骤如下：留取兔膝关节，将关节软骨反复剪成碎片组织，冲洗，弃上清，放置于无菌锥形瓶备用；采用dispase酶和II型胶原酶按12mL DMEM-F12培养液/g软骨加入上述锥形瓶内，搅拌，消化，形成消化悬液；将消化悬液过滤、离心，加入原代软骨细胞培养液，制成无菌的软骨单位悬液，获得的软骨单位进行海藻酸钠凝胶立体培养构建组织工程软骨。本发明的有益效果：软骨单位体外长期培养过程中形态、增殖情况稳定，分泌II型胶原等基质成分生理学功能提高，有望促进组织工程法修复软骨损伤的效果。