海水养殖池塘底泥微生物基因组DNA的提取方法

摘要

本发明公开一种海水养殖池塘底泥微生物基因组DNA的提取方法，依次按照如下步骤进行：取底泥样品于离心管中，加入800～1000μl预处理缓冲液，涡旋；用NaOH调a步骤所得溶液的pH至8，离心取沉淀；向所得沉淀中加入溶菌酶涡旋混匀，再加入SDS、蛋白酶K，涡旋混匀；加入NaCl涡旋混匀，加入65℃预热的CTAB-NaCl，涡旋混匀，65℃作用20min后离心取上清；在上清液中加入等体积的酚/氯仿/异戊醇，涡旋混匀，离心取上清；加入等体积的氯仿/异戊醇涡旋混匀，离心取上清，重复一次；将上清移至离心管，加入异丙醇、NaCl，室温过夜，离心弃上清，向沉淀中加入预冷70％乙醇重悬、洗涤；离心后弃除上清，干燥沉淀，加入30～50μl 1×TE，4℃溶解至少4h。