一种去甲泽拉木醛和二甲双胍的联合用药物

摘要

本发明涉及一种去甲泽拉木醛和二甲双胍的联合用药物，具体地，本发明公开了去甲泽拉木醛在制备增强二甲双胍抑制肿瘤的作用的药物中的用途；还公开了一种治疗肿瘤的联合用药物，其含有去甲泽拉木醛、二甲双胍，还可包含药学上可接受的载体。本发明的联合用药物可以有效治疗多种肿瘤，效果明显优于去甲泽拉木醛和二甲双胍单独使用，临床应用前景良好。

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种去甲泽拉木醛和二甲双胍的联合用药物。

背景技术

癌症是一类引起人类死亡的主要疾病之一，由于当前癌症早期诊断和筛查技术还不完善，大部分病人在初次诊断时已处于癌症晚期，无法通过手术切除治愈。放疗和化疗仍是目前晚期肿瘤治疗的主要手段，然而这类方法不仅有很大的副作用，而且肿瘤的复发率很高，极大的降低了患者的生存质量，因此迫切的需要发展新的治疗手段。

二甲双胍(metformin)最初是用于二型糖尿病患者控制血糖的药物，具有较高的安全性。近年来该药物作为抗肿瘤药物受到了很多关注，研究表明二甲双胍具有抑制肿瘤细胞葡萄糖代谢的能力，通过能量限制进而抑制肿瘤细胞的增殖。尽管有很多的报道指出二甲双胍有抗肿瘤活性，但是都需要使用较高浓度的二甲双胍，因此需要进一步改善该药物的使用方案，寻求更好的联合治疗方案。

发明内容

本发明的目的在于提供一种去甲泽拉木醛和二甲双胍的联合用药物。本发明提供的联合用药物可以显著的抑制多种肿瘤细胞增长，去甲泽拉木醛和二甲双胍共同起到协同增效的作用。

为此，第一方面，本发明提供去甲泽拉木醛在制备增强二甲双胍抑制肿瘤的作用的药物中的用途。

进一步，所述肿瘤包括肺癌、乳腺癌、宫颈癌、胃癌等。

本发明的第二方面提供一种治疗肿瘤的联合用药物，其包括去甲泽拉木醛和二甲双胍。

进一步，所述药物还包括药学上可接受的载体。

进一步，所述去甲泽拉木醛和二甲双胍的摩尔比为1-5:1000-50000，优选为1-2:5000-50000，例如1:5000、1:10000、1:50000、2:5000、2:10000、2:50000等。

本发明的第三方面，提供去甲泽拉木醛和二甲双胍在制备治疗肿瘤的联合用药物中的用途。

进一步，所述去甲泽拉木醛和二甲双胍的摩尔比为1-5:1000-50000，优选为1-2:5000-50000，例如1:5000、1:10000、1:50000、2:5000、2:10000、2:50000等。

进一步，所述肿瘤包括肺癌、乳腺癌、宫颈癌、胃癌等。

与现有技术相比，本发明的技术方案具有以下优点：

本发明提供一种去甲泽拉木醛和二甲双胍的联合用药物，本发明发现，将去甲泽拉木醛和二甲双胍联合使用对肿瘤细胞的杀伤作用强，并且显著优于二者单独使用，经金正均Q值法评价二者联合使用具有协同增效作用。去甲泽拉木醛和二甲双胍已经分别被证实可以用于临床治疗，安全性高。因此，本发明为临床治疗肿瘤提供了一种新的、有效的联合用药及相应的治疗方案，具有良好的临床应用前景。

附图说明

通过阅读下文优选实施方式的详细描述，各种其他的优点和益处对于本领域普通技术人员将变得清楚明了。附图仅用于示出优选实施方式的目的，而并不认为是对本发明的限制。在附图中：

图1：二甲双胍单独用药、二甲双胍与去甲泽拉木醛联合用药对肺癌细胞的抑制作用；

图2：二甲双胍单独用药、二甲双胍与去甲泽拉木醛联合用药对乳腺癌细胞的抑制作用；

图3：二甲双胍单独用药、二甲双胍与去甲泽拉木醛联合用药对宫颈癌细胞的抑制作用；

图4：二甲双胍单独用药、去甲泽拉木醛单独用药、二者联合用药对癌细胞的抑制作用。

具体实施方式

下面将参照附图更详细地描述本公开的示例性实施方式。虽然附图中显示了本公开的示例性实施方式，然而应当理解，可以以各种形式实现本公开而不应被这里阐述的实施方式所限制。相反，提供这些实施方式是为了能够更透彻地理解本公开，并且能够将本公开的范围完整的传达给本领域的技术人员。

实施例1

将肺癌细胞系A549、乳腺癌细胞系MDA-MB-231和宫颈癌细胞系HeLa消化后进行细胞计数，按每孔1000个细胞分别接种于96孔板，进行培养。对于每种癌细胞，分别设置二甲双胍单药组、联合用药组；待细胞贴壁后，向二甲双胍单药组加入二甲双胍(A549细胞系浓度梯度：0.01、1、2.5、5、20、50、75mM；MDA-MB-231细胞系浓度梯度：1、10、20、40、50、60、75、150mM；HeLa细胞系浓度梯度：1、5、10、15、20、40、75mM)，联合用药组加入2μM的去甲泽拉木醛和二甲双胍(A549细胞系浓度梯度：0.01、1、5、10、20、30、75、150mM；MDA-MB-231细胞系浓度梯度：1、10、20、40、50、75、150mM；HeLa细胞系浓度梯度：1、5、10、15、20、40、75mM)进行联合用药。

培养48h后，每孔加10μL CCK-8混匀，继续培养2小时后，用酶标仪检测450nm的吸光度，细胞存活率计算方式为：细胞存活率＝(加药孔吸光度–空白孔吸光度)/(不加药物孔吸光度-空白孔吸光度)。

实验结果如图1-3所示，图1-3分别为二甲双胍单独用药、二甲双胍与去甲泽拉木醛联合用药对肺癌细胞、乳腺癌细胞和宫颈癌细胞的作用结果。根据上述实验结果，当去甲泽拉木醛和二甲双胍联合使用时，其抑制肿瘤细胞的效果显著优于二甲双胍单药处理组。

实施例2

将对数生长期的肺癌细胞系A549、乳腺癌细胞系MDA-MB-231、宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系NCI-N87分别用胰酶消化计数，以1000个细胞/孔的密度接种于96孔板，待细胞贴壁后，每种细胞都分为四组，分别为对照组、去甲泽拉木醛单药组、二甲双胍单药组、联合用药组；各组分别加入以下试剂：

1)A549细胞：对照组：DMSO；去甲泽拉木醛单药组：2μM去甲泽拉木醛；二甲双胍单药组：5mM二甲双胍；联合用药组：2μM去甲泽拉木醛和5mM二甲双胍。

2)MDA-MB-231细胞：对照组：DMSO；去甲泽拉木醛单药组：2μM去甲泽拉木醛；二甲双胍单药组：50mM二甲双胍；联合用药组：2μM去甲泽拉木醛和50mM二甲双胍。

3)HeLa细胞对照组：DMSO；去甲泽拉木醛单药组：2μM去甲泽拉木醛；二甲双胍单药组：10mM二甲双胍；联合用药组：2μM去甲泽拉木醛和10mM二甲双胍。

4)NCI-N87细胞：对照组：DMSO；去甲泽拉木醛单药组：1μM去甲泽拉木醛；二甲双胍单药组：10mM二甲双胍；联合用药组：1μM去甲泽拉木醛和10mM二甲双胍。

培养48h后，每孔加10μL CCK-8混匀，继续培养2小时后，用酶标仪检测450nm的吸光度，计算细胞存活率，统计结果见图4所示(P＜0.05)。

采用标准协同指数计算公式Q＝E(A+B)/(E(A)+E(B)-E(A)×E(B))，(E(A+B)为两药联用抑制率，E(A)为A药单用的抑制率，E(A)为B药单用的抑制率)。进行去甲泽拉木醛与二甲双胍的协同效应统计，当Q值大于1.15时为协同效应。

在肺癌细胞系A549中E(去甲泽拉木醛)＝0.04，E(二甲双胍)＝0.17，E(去甲泽拉木醛+二甲双胍)＝0.39，Q＝1.90，显示为协同效应。在乳腺癌细胞系MDA-MB-231中E(去甲泽拉木醛)＝0.16，E(二甲双胍)＝0.45，E(去甲泽拉木醛+二甲双胍)＝0.62，Q＝1.152，显示为协同效应。在宫颈癌细胞系HeLa中E(去甲泽拉木醛)＝0.12，E(二甲双胍)＝0.38，E(去甲泽拉木醛+二甲双胍)＝0.59，Q＝1.30，显示为协同效应。在胃癌细胞系NCI-N87中E(去甲泽拉木醛)＝0.09，E(二甲双胍)＝0.38，E(去甲泽拉木醛+二甲双胍)＝0.51，Q＝1.16，显示为协同效应。

综上，在本发明提供的联合用药物中，去甲泽拉木醛和二甲双胍具有协同增效的作用。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。