香蕉MtLUT5基因、克隆方法、表达载体及应用

摘要

本发明公开香蕉MtLUT5基因，提取“派露丝”香蕉总RNA，反转录合成cDNA，设计特异引物，利用PCR方法获得MtLUT5基因的全长cDNA，与‑Blunt载体连接，转化大肠杆菌Trans‑T1感受态细胞，挑取阳性克隆得到香蕉MtLUT5基因。测定了“派露丝”香蕉不同组织LUT5基因表达水平，发现生殖器官中的表达水平明显高于营养器官；测定了黑暗培养后AAA、BBB、TTT基因型香蕉组培苗表达量，发现黑暗处理后AAA基因型LUT5表达水平提高，BBB基因型降低，TTT基因型香蕉转录组则不含LUT5基因。连接到植物表达载体pBI121上，构建pBI121‑MtLUT5重组载体。该基因会提高香蕉果肉类胡萝卜素总含量，导致β‑胡萝卜素、紫黄质、叶黄素、叶黄素癸酸酯含量上调，导致5,6环氧叶黄素‑发酸酯‑棕榈酸酯、叶黄素油酸酯含量下调。