原癌基因c-myc核酶表达载体抑制血管平滑肌细胞的c-myc表达

摘要

目的 构建原癌基因c-myc核酶表达载体以抑制心血管系统细胞异常增殖.方法 采用DNASIS软件对大鼠c-myc mRNA进行二级结构和最低自由能分析,确定第4600位核苷酸作为核酶的切割位点,设计并合成c-myc核酶.通过体外切割实验证明该核酶的有效性.进一步构建成c-myc核酶表达载体,转染同步化血管平滑肌细胞(VSMC)以检测其对原癌基因c-myc表达的影响.结果 体外切割实验显示该核酶能有效地将85bp的模板切割成60和25 bp的二个片段.所构建载体经酶切法和基因测序法证明其序列的正确性.转染VSMC后能有效抑制血管紧张素Ⅱ诱导的c-myc的表达.结论 c-myc核酶表达载体能有效抑制VSMC的c-myc过度表达,适合用于动脉增殖性疾病的基因治疗.