长牡蛎β-tubulin基因的电穿孔基因编辑方法及应用

摘要

本发明公开了一种长牡蛎β‑tubulin基因的电穿孔基因编辑方法及应用，属于基因编辑技术领域。本发明的长牡蛎β‑tubulin基因的电穿孔基因编辑方法是在长牡蛎受精卵出现第一极体10min内完成电穿孔实验，对长牡蛎β‑tubulin基因进行电穿孔基因编辑；其中，电穿孔实验体系中sgRNA和Cas9蛋白复合物中sgRNA与Cas9蛋白终浓度为30ng/μL；电穿孔实验参数为40V/50ms。在该条件下，能够获得长牡蛎β‑tubulin基因的高编辑效率和幼虫的高存活率，并且可以降低sgRNA和Cas9蛋白使用量；降低时间成本和人力成本。