一种蛋白印迹法检测试剂盒的制备方法和应用

摘要

本发明提供一种蛋白印迹法检测试剂盒的制备方法和应用，该试剂盒至少包括：包埋重组抗原的硝酸纤维素膜和碱性磷酸酶标记的鼠抗猪IgG。试剂盒制备方法包括：将重组抗原于电压100V、电流1～2A的条件下在聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳，通电时间为45min；将步骤1获得的产物采用转膜液进行转膜处理；将转膜处理后的膜浸泡在封闭液内进行封闭处理；之后将膜风干得到包埋重组抗原的硝酸纤维素膜；采用过碘酸钠法将活化的碱性磷酸酶对鼠抗猪IgG进行标记，之后透析去除未结合的碱性磷酸酶，得到碱性磷酸酶标记的鼠抗猪IgG，再将碱性磷酸酶标记的鼠抗猪IgG用含0.12‰绿色素的酶标稀释液稀释，并与包埋重组抗原的硝酸纤维素膜一起于2～8℃避光封闭保存。