一种超速检测阴道毛滴虫的RT-PCR方法

摘要

本发明涉及一种超快速检测阴道毛滴虫的RT‑PCR方法，包括通过针对阴道毛滴虫18S核糖体RNA序列设计了一对特异性引物和探针PF1、PR1、FQQ，以及通过采用荧光定量PCR反应对待测样品核酸进行实时荧光定量PCR检测的反应程序；实时荧光定量逆转录PCR反应程序为：37℃污染消化2min；95℃预变性30s；95℃变性2s，69℃退火延伸13s，45个循环。本发明引物、探针使延伸温度满足Taq DNA聚合酶的最佳延伸温度，从而有效缩短扩增时间。本发明的延长引物与模板完全匹配，且Tm值达到69℃左右，可使退火延伸同时在69℃开始进行，从一开始就可以直接采用两步法扩增，减少升降温过程，有效缩短检测时间。