一种富集大鼠浆细胞及建立浆细胞杂交瘤的方法

摘要

本发明公开了一种富集大鼠浆细胞及建立浆细胞杂交瘤的方法，包括以下步骤：S1、以大鼠CD138为靶点，利用杂交瘤技术开发特异性抗大鼠CD138单克隆抗体；S2、使用抗大鼠CD138抗体对大鼠浆细胞进行富集，抗大鼠CD138抗体中包含EZ‑Link NHS‑PEG4‑生物素；S3、对小鼠骨髓瘤细胞和大鼠浆细胞进行处理，将处理后的小鼠骨髓瘤细胞和大鼠浆细胞进行细胞电融合；S4、将融合细胞转移至HAT筛选培养基中，在CO2培养箱中培养1～2小时，再铺于96孔细胞培养板中培养，7～14天后进行杂交瘤抗体筛选。本发明提供的方法富集度高，且改良了大鼠浆细胞杂交瘤融合技术，使杂交瘤抗体阳性率提高了10‑20倍，极大地提高融合效率和大鼠浆细胞的生物利用度，且本方法铺板数量低，节约了人力和物力成本。