一种Taq DNA聚合酶与核酸内切酶嵌合体及其制备方法与应用

摘要

本发明公开了一种Taq DNA聚合酶与核酸内切酶嵌合体及其制备方法与应用，属于生物技术领域。本发明的嵌合体是野生型Taq DNA聚合酶经缺失突变和定点突变，以及在N末端融合一段高效亲和双链DNA结构域和瓣状核酸内切酶1等方式改造而成。本发明的嵌合体在野生型Taq DNA聚合酶的基础上，大幅提高了在PCR反应中的扩增效率和延伸速率，经化学修饰热启动后，适用于各类常规PCR、快速PCR、长片段PCR和热启动PCR。同时，该嵌合体具有5’‑3’核酸外切酶活性，可应用于探针法qPCR中。该嵌合体对PCR抑制剂具有较强的耐受能力，适合在抗凝血或常规滤纸收集的血液中直接扩增DNA。