一种cAMP荧光探针G-Flamp1的应用

摘要

本发明公开了一种cAMP荧光探针G‑Flamp1的应用，一种cAMP荧光探针G‑Flamp1在激发波长为430‑470nm的单光子或激发波长为880‑920nm的双光子成像中的应用，所述G‑Flamp1的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。相较于目前已有荧光探针的动态范围，本发明在37℃生理温度培养细胞中，采用430‑470nm单光子或880‑920nm双光子激发G‑Flamp1探针，获得了目前最大动态范围ΔF/F0～10‑15，在检测灵敏度方面有了很大提高；在活体脑片神经元中，在60μM Forskolin刺激下，ΔF/F0平均值也达到了7，可以在神经元中很好的表达和响应；实际使用时，将G‑Flamp1表达在离体培养的哺乳动物细胞或活体细胞中，利用荧光显微镜或者双光子显微镜，检测细胞受特定刺激后cAMP浓度是否发生改变。