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重组人纤连蛋白及其制备、活性测定和稳定性实验方法

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本发明提供了一种重组人纤连蛋白及其制备、活性测定和稳定性实验方法,包括：利用大肠杆菌密码子的偏好性对重组人纤连蛋白进行密码子优化，构建重组表达载体。利用基因工程方法进行表达纯化，通过AKTA纯化仪使用PMB柱除细菌内毒素。经通过本发明的技术方案，重组人纤连蛋白纯化时间短，表达量高，纯度可达94%‑96%，细菌内毒素含量低，更具安全性，同时稳定性较好，也具有促进细胞增殖活性。

著录项

公开/公告号CN113480636A

专利类型发明专利
公开/公告日2021-10-08

原文格式PDF
申请/专利权人烟台科瑞斯生物技术有限责任公司;
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申请/专利号CN202110695526.6
发明设计人刘传玉;王曼宇;李泽鹏;李晓晖;张俊梅;
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申请日2021-06-23
分类号C07K14/78(20060101);C07K1/22(20060101);C12N15/12(20060101);C12N15/70(20060101);G01N21/31(20060101);
代理机构37218 济南泉城专利商标事务所;
代理人张贵宾
地址 264000 山东省烟台市莱山区高新区科技大道39号
入库时间 2023-06-19 12:49:58

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法律状态
2023-11-03

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发明专利权授予

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1. 重组人纤连蛋白及其制备、活性测定和稳定性实验方法 [P] . 中国专利： CN113480636A . 2021-10-08
2. 重组人尿激酶原氨基末端片段的制备、活性测定方法及其在疾病治疗中的应用 [P] . 中国专利： CN1706943A . 2005-12-14
3. A process for obtaining a kunitz protease inhibitor from an amblyomma cajennense tick salivary gland cdna library: clone oligonucleotide sequence, and recombinant protein amino acid sequence, recombinant protein; process for determination of inhibitory activity on activated factor x, process for determination of anticoagulant activity in plasma, process for determination of apoptotic activity in human and murine tumor cell lines, process for determination of anti-metastatic activity in melanoma tumor, process of in vitro and in vivo anti-cancer activity determination, recombinant use in different homeostatic (coagulation and immune response), anti-proliferative, anti-apoptotic and anti-angiogenic mechanisms [P] . BRPI0406057A . 2006-05-02

机译：从空肠吸虫唾液腺cdna文库获得kunitz蛋白酶抑制剂的方法：克隆寡核苷酸序列和重组蛋白氨基酸序列，重组蛋白;测定对活化因子x的抑制活性的方法，测定血浆中抗凝活性的方法，测定人和鼠肿瘤细胞系中凋亡活性的方法，测定黑素瘤肿瘤中抗转移活性的方法，体外方法和体内抗癌活性的测定，重组用于不同的稳态（凝血和免疫反应），抗增殖，抗凋亡和抗血管生成机制
4. Preparation of isolated protein, substantially pure or recombinant, isolated trt protein, substantially pure or recombinant isolated trt protein, substantially pure or recombinant, isolated trt protein or a variant thereof, or a fragment, polynucleotide, synthetic, substantially pure or recombinant, isolated nucleic acid, encoding a trt protein, expression vector, transfected cell, non-human animal, or its progeny, transgenic non-human animal, antibody or its binding fragment, antibody, specifically immunoreactive under immunologically reactive conditions, for a trt protein or its immunogenic fragment, processes of determining whether a compound or treatment is a modulator of a trt activity or expression, of determining whether a test compound is a modulator of a trt activity, of preparing recombinant telomerase, to detect a trt gene product in a sample, to detect the presence of d and at least one telomerase positive human cell in a biological sample comprising human cells, to diagnos [P] . BR9711844A . 2000-01-18

机译：分离的蛋白质，基本上纯的或重组的分离的trt蛋白，基本上纯的或重组的分离的trt蛋白，基本上纯的或重组的分离的trt蛋白或其变体或片段，多核苷酸，合成的，基本上纯的或重组的分离的核酸的制备编码trt蛋白的酸，表达载体，转染的细胞，非人类动物或其后代，转基因非人类动物，抗体或其结合片段，抗体，在免疫反应条件下对trt蛋白或其免疫原具有特异性片段，确定化合物或处理是否是trt活性或表达的调节剂，确定测试化合物是否是trt活性的调节剂，制备重组端粒酶以检测样品中trt基因产物的过程，检测包含人细胞的生物样品中d和至少一种端粒酶阳性人细胞的存在，以进行诊断
5. PLASMID FOR EXPRESSION IN CELLS OF BACTERIUM BELONGING TO Escherichia CLASS, NON-ACTIVE PREDECESSOR OF DNase I OF HUMAN OR ITS MUTEINS; BACTERIUM BELONGING TO Escherichia CLASS, - PRODUCER OF NON-ACTIVE PREDECESSOR OF RECOMBINANT DNase I OF HUMAN OR ITS MUTEIN; PREDECESSOR OF RECOMBINANT DNase I OF HUMAN OR ITS MUTEIN; METHOD FOR OBTAINING RECOMBINANT DNase I OF HUMAN OR ITS MUTEIN; METHOD FOR OBTAINING CONJUGATES OF POLYETHYLENE GLYCOL AND RECOMBINANT MUTEIN OF HUMAN DNase I, FERMENTATIVE ACTIVE CONJUGATE OF MUTEIN OF RECOMBINANT DNase I OF HUMAN [P] . 俄罗斯专利： RU2502803C2 . 2013-12-27

机译：质粒表达于人或其突变蛋白的DNA酶I的非活性前体-大肠埃希菌类细菌细胞中;属于埃希氏菌属的细菌，-人或其突变蛋白重组DNA酶I的非活性前体的生产者;人或其突变蛋白的重组DNA酶I的前体;获得人或其突变蛋白的重组DNA酶I的方法;获得人DNA酶I的聚乙二醇和重组蛋白的结合物，人重组DNA酶I的发酵性活性结合物的方法