胆管癌胆汁外泌体的提取方法

摘要

本发明公开了胆管癌胆汁外泌体的提取方法，包括步骤一：标本的采集；步骤二：外泌体的提取：离心前一天，胆汁标本从冰箱取出置于4度冰箱融化，得到50ml黄色胆汁；胆汁以4°、300g、5min离心1次，然后取上清液；上清以4°、2000g、10min离心1次，然后取上清；得到的50mL上清液稀释至60mL，以4°、12500g、离心30min，离心结束后取上清液；得到的胆汁上清液稀释至70mL，过0.22um筛子后，以4°、120000g、离心2h，得到底部沉淀，将该沉淀用无菌D‑PBS反复吹打溶解后转移至EP管中，共得到200uL外泌体悬液，NTA检测后置于‑80°冰箱中保存；步骤三：外泌体的鉴定。通过标本的采集、外泌体的提取、外泌体的鉴定，进而能够实现对胆管癌胆汁外泌体的提取，在临床诊疗中有巨大的潜在应用价值。