一种二代测序方法和文库构建方法

摘要

本申请公开了一种二代测序方法和文库构建方法。本申请的二代测序方法包括，将测序接头包埋进Tn5转座酶中，对待测DNA样本进行处理，一步获得片段化、末端修复和接头连接的样本，然后，终止Tn5酶促反应；采用带有双端barcode的引物组，对Tn5转座子处理产物进行PCR扩增；纯化扩增产物，对其测序，使用转录本组装软件和转录本丰度评估软件对下机数据进行组装和丰度评估，获得测序结果。本申请测序方法，流程简单快速，提高了测序成功率和组装结果质量，在样品有污染或样品含有复杂序列的时候仍能进行高质量测序；本申请方法既具有新一代测序的优点，又具有Sanger测序同样甚至更高的准确性，能替代Sanger测序。