与癫痫相关SCN1A基因的启动子及其构建方法和临床应用

摘要

本发明涉及与癫痫相关的SCN1A基因的启动子及其构建方法和临床应用，其特征是：1)基因启动子的核苷酸序列为序列表中SEQ ID №：1的DNA序列；2)由核心启动子及其上游调控区序列和5’非翻译区外显子序列构成，其中，序列表中非划线部分为核心启动子及其上游调控区序列，划线部分为5’非翻译区外显子序列。其构建方法是：1)利用正常人的外周血制备基因组DNA，利用正常人海马组织及大脑皮质制备总RNA；2)准备好所需的菌株、细胞株及质粒；3)准备好所需的试剂及试剂盒，利用试剂抽提白细胞基因组DNA和脑组织总RNA；4)以序列表中SEQ ID №：2作为引物，进行PCR扩增，获得与癫痫相关的SCN1A基因启动子序列，并构建该启动子的表达载体。本发明可用于癫痫和其它神经系统疾病患者的SCN1A基因启动子及5’非翻译区所有外显子突变的功能鉴定，将在癫痫及其它神经系统疾病的临床检测中发挥重要作用。