一种阿魏酸哌嗪残留溶剂的GC检测方法

摘要

本发明涉及药物分析技术领域，公开了一种阿魏酸哌嗪残留溶剂的GC检测方法，它包括：配置分析溶液；使用气相色谱柱，采用程序升温方法；将配置好的分析溶液上机测定。本发明分析方法能够有效且准确的测定阿魏酸哌嗪中各种残留溶剂，从而确保产品的质量可控。

说明书

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，特别涉及一种阿魏酸哌嗪残留溶剂的气相色谱检测方法。

背景技术

在药物分析中所称的“残留溶剂(Residual organic solvents)”是指在原料药、辅料以及制剂生产中使用的，但在工艺过程中未能完全去除的有机挥发性化合物。残留溶剂的种类与药物的合成工艺密切相关。残留溶剂的检测是控制药品质量的重要指标。

阿魏酸哌嗪，化学名为3-甲氧基-4-羟基桂皮酸哌嗪，其结构式如下：

在临床上，阿魏酸哌嗪对心血管疾病有较好的疗效，能增加冠脉流量，改善心肌缺血，缓解血管痉挛，延长凝血时间及抗血小板凝集。阿魏酸哌嗪主要用于各种肾病的治疗，如慢性肾炎、肾病综合征和早期尿毒症等。临床疗效表明，阿魏酸哌嗪可减少慢性肾小球疾病患者的尿蛋白，升高血浆蛋白，降低血尿素氮和肌酐水平，可降低全血黏度及血浆黏度，改善血液流变学，促进肾脏微循环，有助于提高机体的免疫功能，延缓肾脏疾病的发展。

阿魏酸哌嗪合成工艺中使用到的溶剂是乙醇；根据ICH指导原则，乙醇中可能存在苯，而苯是一类溶剂，具有极强的毒性，故需要进行控制。

因合成路线的不同，导致阿魏酸哌嗪的残留溶剂不同；在各国药典和文献中，均未查阅到检测阿魏酸哌嗪中乙醇和苯的方法。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一种阿魏酸哌嗪残留溶剂的GC检测方法，通过用毛细管色谱柱，调整适当的升温程序，解决了乙醇和苯的分离问题，实现了对阿魏酸哌嗪原料药质量的控制，且此方法灵敏度高，专属性强，操作简单。

本发明的阿魏酸哌嗪有关物质GC的检测方法，包括以下步骤：

a)配置分析溶液；

b)色谱条件

色谱柱为毛细管色谱柱，采用梯度升温方法，所述起始柱温为30～60℃，维持3～5min，以15～25℃/min梯度升温至200～250℃，维持1～3min。采用顶空进样；

c)上机测定

取步骤a)制成的分析溶液1-3ml注入气相色谱仪，进行色谱分析，并记录色谱图。

优选方案，所述步骤a)样品分析溶液配制遵循以下要求：用N,N-二甲基甲酰胺、水、N,N-二甲基甲酰胺-水混合溶液溶解样品，制成分析溶液。

所述步骤b)色谱条件中，采用FID检测器；进样口温度为210～230℃；检测器温度200～250℃；气流速度为2～4ml/min；分流比为5:1。

在一些实施例中，所述毛细管色谱柱优选6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱。

在一些实施例中，所述反相色谱柱的规格为：柱长介于10m至30m，色谱柱内径介于0.2mm至0.45mm，膜厚介于1μm至3μm，优选为规格为30m×0.32mm，膜厚1.8μm的毛细管色谱柱。

优选方案为：

步骤a)用N,N-二甲基甲酰胺-水混合液溶解样品，制成分析溶液，所述的N,N-二甲基甲酰胺-水混合液溶液中有机相体积百分比小于50％；

步骤b)所述毛细管色谱柱为柱长30m、直径0.32mm、膜厚1.8μm的6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷为固定相毛细管色谱柱，以N

步骤c)取步骤a)制成的分析溶液2ml置于顶空瓶中，采用顶空进样；平衡温度为90℃；平衡时间为30min，进行色谱分析，并记录色谱图。

上述方法分析可用于分离样品中乙醇和苯。

本发明能够有效的测定阿魏酸哌嗪溶液中乙醇和苯。残留溶剂间分离度大于1.5。

本发明的方法耐用性强，不会增加操控难度。色谱条件在进样口温度、气流流速、柱温发生微小变化时，残留溶剂之间分离度均大于1.5，符合要求。样品重复进样，实验结果重复性良好。

本发明的方法能够准确计算各溶剂残留量，采用外标法测定，各溶剂残留回收率均在90.0％～108.0％范围内。

上述方法的检测可以确保产品的质量可控，本发明方法可将乙醇和苯有效分离，检测专属性、灵敏度和准确性均良好；方法操作简单，对仪器要求不高。

附图说明

图1、实施例1气相色谱图；

图2、实施例2气相色谱图；

图3、实施例3气相色谱图；

图4、实施例4气相色谱图；

图5、实施例5气相色谱图；

图6、实施例6气相色谱图；

图7、实施例7气相色谱图；

图8、实施例8气相色谱图；

图9、实施例9气相色谱图。

具体实施方式

下面结合说明书附图和具体的实施例，对本发明作详细描述。这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的试验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

实施例一

(1)仪器与色谱条件

高效液相色谱仪：Thermo气相色谱仪及工作站；

色谱柱：6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱(Agilent DB-624UI 30m×0.32mm，1.8μm)；

以N

(2)实验步骤

精密称取乙醇、苯适量，加稀释液溶解并定量稀释制成每1ml中约含乙醇500μg、苯0.2μg的混合溶液，精密移取2ml至顶空瓶中，加盖密封，作为对照品溶液；

取上述分析溶液顶空进样，平衡温度为90℃；平衡时间为30min，进行色谱分析，并记录色谱图。结果见附图1和表1。

表1实施例1色谱结果表

实施例二

(1)仪器与色谱条件

高效液相色谱仪：Thermo气相色谱仪及工作站；

色谱柱：6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱(Agilent DB-624UI 30m×0.32mm，1.8μm)；

以N

(2)实验步骤

精密称取乙醇、苯适量，加稀释液溶解并定量稀释制成每1ml中约含乙醇500μg、苯0.2μg的混合溶液，精密移取2ml至顶空瓶中，加盖密封，作为对照品溶液；

取上述分析溶液顶空进样，平衡温度为90℃；平衡时间为30min，进行色谱分析，并记录色谱图。结果见附图2和表2。

表2实施例2色谱结果表

实施例三

(1)仪器与色谱条件

高效液相色谱仪：Thermo气相色谱仪及工作站；

色谱柱：6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱(Agilent DB-624UI 30m×0.32mm，1.8μm)；

以N

(2)实验步骤

精密称取乙醇、苯适量，加稀释液溶解并定量稀释制成每1ml中约含乙醇500μg、苯0.2μg的混合溶液，精密移取2ml至顶空瓶中，加盖密封，作为对照品溶液；

取上述分析溶液顶空进样，平衡温度为90℃；平衡时间为30min，进行色谱分析，并记录色谱图。结果见附图3和表3。

表3实施例3色谱结果表

实施例四

(1)仪器与色谱条件

高效液相色谱仪：Thermo气相色谱仪及工作站；

色谱柱：6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱(Agilent DB-624UI 30m×0.32mm，1.8μm)；

以N

(2)实验步骤

精密称取乙醇、苯适量，加稀释液溶解并定量稀释制成每1ml中约含乙醇500μg、苯0.2μg的混合溶液，精密移取2ml至顶空瓶中，加盖密封，作为对照品溶液；

取上述分析溶液顶空进样，平衡温度为90℃；平衡时间为30min，进行色谱分析，并记录色谱图。结果见附图4和表4。

表4实施例4色谱结果表

实施例五

(1)仪器与色谱条件

高效液相色谱仪：Thermo气相色谱仪及工作站；

色谱柱：6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱(Agilent DB-624UI 30m×0.32mm，1.8μm)；

以N

(2)实验步骤

精密称取乙醇、苯适量，加稀释液溶解并定量稀释制成每1ml中约含乙醇500μg、苯0.2μg的混合溶液，精密移取2ml至顶空瓶中，加盖密封，作为对照品溶液；

取上述分析溶液顶空进样，平衡温度为90℃；平衡时间为30min，进行色谱分析，并记录色谱图。结果见附图5和表5。

表5实施例5色谱结果表

实施例6

(1)仪器与色谱条件

高效液相色谱仪：Thermo气相色谱仪及工作站；

色谱柱：6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱(Agilent DB-624UI 30m×0.32mm，1.8μm)；

以N

(2)实验步骤

精密称取乙醇、苯适量，加稀释液溶解并定量稀释制成每1ml中约含乙醇500μg、苯0.2μg的混合溶液，精密移取2ml至顶空瓶中，加盖密封，作为对照品溶液；

取上述分析溶液顶空进样，平衡温度为90℃；平衡时间为30min，进行色谱分析，并记录色谱图。结果见附图6和表6。

表6实施例6色谱结果表

实施例7

(1)仪器与色谱条件

高效液相色谱仪：Thermo气相色谱仪及工作站；

色谱柱：6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱(Agilent DB-624UI 30m×0.32mm，1.8μm)；

以N

(2)实验步骤

精密称取乙醇、苯适量，加稀释液溶解并定量稀释制成每1ml中约含乙醇500μg、苯0.2μg的混合溶液，精密移取2ml至顶空瓶中，加盖密封，作为对照品溶液；

取上述分析溶液顶空进样，平衡温度为90℃；平衡时间为30min，进行色谱分析，并记录色谱图。结果见附图7和表7。

表7实施例7色谱结果表

实施例8

(1)仪器与色谱条件

高效液相色谱仪：Thermo气相色谱仪及工作站；

色谱柱：6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱(Agilent DB-624UI 30m×0.32mm，1.8μm)；

以N

(2)实验步骤

精密称取乙醇、苯适量，加稀释液溶解并定量稀释制成每1ml中约含乙醇500μg、苯0.2μg的混合溶液，精密移取2ml至顶空瓶中，加盖密封，作为对照品溶液；

取上述分析溶液顶空进样，平衡温度为80℃；平衡时间为30min，进行色谱分析，并记录色谱图。结果见附图8和表8。

表8实施例8色谱结果表

实施例9

(1)仪器与色谱条件

高效液相色谱仪：Thermo气相色谱仪及工作站；

色谱柱：6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱(Agilent DB-624UI 30m×0.32mm，1.8μm)；

以N

(2)实验步骤

精密称取乙醇、苯适量，加稀释液溶解并定量稀释制成每1ml中约含乙醇500μg、苯0.2μg的混合溶液，精密移取2ml至顶空瓶中，加盖密封，作为对照品溶液；

取上述分析溶液顶空进样，平衡温度为100℃；平衡时间为30min，进行色谱分析，并记录色谱图。结果见附图9和表9。

表9实施例9色谱结果表