从大龄小鼠结肠固有层中分离纯化固有淋巴样细胞的方法

摘要

本发明涉及细胞分离纯化技术领域，公开了一种从大龄小鼠结肠固有层中分离纯化固有淋巴样细胞的方法，步骤：小鼠结肠加细胞解离液孵育；加细胞消化液孵育，过滤，将结肠加HBSS中离心，去除上清液加HBSS重悬，并加壳聚糖包覆改性羰基铁，用金属过滤网过滤，在过滤时对过滤网通2～5mA的微弱电流，得过滤液；用44％第一Percoll液重悬后移至底部铺有67％第二Percoll液的离心管离心；收集中间层细胞，再离心，收集沉淀；用稀释后抗体混悬细胞团，离心，收集沉淀；用流式缓冲液重悬沉淀，上机流式细胞仪得到固有淋巴样细胞。本发明能够克服大龄小鼠结肠固有层中结缔组织对固有淋巴样细胞的分离纯化的影响，提高大龄小鼠肠粘膜中固有淋巴样细胞的分离纯度和绝对细胞数量。