一种基于多点共价作用制备固定化磷脂酶C的方法

摘要

本发明涉及磁性固定化酶领域，公开了一种基于多点共价作用制备固定化磷脂酶C的方法。采用共沉淀法制备了Fe3O4/SiO2磁性纳米粒子，采用超支化缩水甘油进行活化，并对该载体进行羧基修饰，制取一种羧基修饰后的磁性载体；利用多点共价结合的固定方式使载体与磷脂酶C结合，首先，在较低pH下载体上存在的‑COOH与富含正电荷的酶蛋白区域进行阳离子交换，发生静电相互作用。随后提高体系pH，活化后的羧基与酶上的氨基发生酰胺化反应形成共价键。本发明以一种多点共价结合的固定化方式为实际生产中大豆毛油酶法脱胶提供了一种更稳定的固定化磷脂酶，为之后应用到连续化生产中提供依据。