兔源噬菌体展示抗体库构建方法

摘要

本发明公开了一种兔源噬菌体展示抗体库构建方法，包括步骤一，利用Trizol法提取免疫兔子脾脏细胞RNA；步骤二，使用反转录试剂盒将脾脏细胞RNA反转录得到单链cDNA；步骤三，抗体轻、重链可变区PCR扩增及scFv片段拼接；步骤四，酶切质粒和PCR拼接产物；步骤五，连接到Pcomb3xss线性化载体，并通过凝胶电泳对连接产物回收纯化；步骤六，电击转化到SS320感受态细胞。本发明所述方法快速、廉价、获得抗体基因序列后更容易保存、放大生产等优点，比杂交瘤技术制备单克隆抗体技术更方便操作。