包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒及其制备方法

摘要

本发明涉及包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒及其制备方法，将类固醇类药物和生物降解性聚酯类高分子溶于适当的有机溶剂中并喷射至低温的烃溶液中以制备冷冻的微粒后，将其放入低温的盐的水溶液中，以溶解包含在微粒中的有机溶剂，通过上述制备方法制备了包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒，并确认到所制备的包含类固醇类或作为类固醇类的性激素类药物的生物降解性高分子微粒具有优异的生物相容性、生物降解性、多孔性及机械强度等，且类固醇类或作为类固醇类的性激素类药物可缓慢且长期释放，由此可期待，利用本发明的包含类固醇类或作为类固醇类的性激素类药物的生物降解性高分子微粒适当地长时间持续释放药物，可开发能够治疗因类固醇类药物或作为类固醇类的性激素的减少或缺乏而发生的症状及疾病的制剂。

说明书

技术领域

本发明涉及一种包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒及其制备方法。

背景技术

直到最近的药物研究一直聚焦于新药的开发上，以提高新的疾病或以现有药物难以治疗的疾病的治疗效果。然而，由于新药开发的困难、高投资成本的风险以及实际实验室研究结果和临床应用的差异等问题，在国外也只有部分大型生物技术公司进行了相关研究及开发，而韩国在相关研究及产品开发上相对受到限制。与此同时，通过各种研究结果论证了药物释放到实际疾病部位的方式，对药物的疾病治疗效果产生诸多影响，因此不仅是新药的开发，对于研究开发药物的释放方法的必要性也在突显。

药物释放系统(drug delivery system)技术是如下所述的一系列技术的总称：利用各种物理化学技术控制具有药理活性的物质向细胞、组织、脏器及器官的输送及释放，以发挥最佳的效力。最基本形式的药物释放系统技术通过调节如口服胶囊(oral capsule)和片剂(tablets)进入人体内内部并溶于体液中的速度来调节药物的输送速度的方式开始。这是当前最普遍的技术，常用将药物混合到高分子(polymer)材料或涂覆于表面的方法，并且采用高分子材料溶于水的过程中，药物流出并吸收到体内的方式。除此之外，还开发了在生物相容性高分子(biocompatible polymer)中混合药物制成的基质方式的输送装置、利用生物降解性高分子(biodegradable polymer)根据生物降解的速度来调节药物输送的速度的生物降解性输送装置、或利用膨胀(swelling)的程度根据植入的周边环境的温度、pH、电场强度(electrical strength)等变化的方式来调节药物输送的利用水凝胶(hydrogel)材料的方式等。

药物输送颗粒大致被制成数百微米(μm)至几十纳米(nm)，最初主要使用乳液方式，但是最近，利用微流体系统或微米或纳米模板(template)来改善颗粒大小的均匀性或超出简单的球形颗粒，朝着制造具有各种形状的颗粒的方向正在进行研究(柳元亨，2012)。

一方面，类固醇(steroid)作为具有强力的消炎效果和免疫调节效果的药剂，正用于包括类风湿关节炎疾病的多种疾病。长期使用和大剂量使用类固醇会出现副作用和对药剂的耐药性，有了减少类固醇剂量会使效果消失的经验后，就形成了为了缓解症状而临时使用类固醇的想法。大部分的副作用与类固醇的使用剂量和时间成正比。因此，有必要开发一种可以通过类固醇调节炎症的同时能够最小化副作用的技术。

属于类固醇类的性激素直接释放到血液中后，表现出对生殖功能特异性的生理作用。作为男性激素的睾酮有助于男性的第二性征，促进精子形成，使前列腺和精囊等男性生殖器发育，并使肌肉发达等。作为女性激素的雌激素促进子宫的发育及乳汁的分泌，并有助于女性的第二性征，孕酮起到使子宫内膜增生，从而成为受精卵易于着床的状态，并维持妊娠等的作用。

性激素的分泌受下丘脑和垂体的调节。当下丘脑刺激垂体前叶时，垂体分泌卵泡刺激素(follicle stimulating hormone)和促黄体生成素(luteinizing hormone)，促进男性和女性的性激素分泌。性激素不足时，女性会出现月经不调和痛经、月经周期不规则、肾脏及乳房发育不良、皮肤问题、性欲低下及性冷淡、阴道收缩力减少、更年期障碍提前及更年期障碍、皮肤老化、抑郁症、神经过敏、性交痛、尿失禁、阴道分泌物减少、绝经、骨质疏松、不孕、各种女性疾病(Choi,D.S.,等,2012)，男性会出现性欲下降、性功能下降、疲劳、抑郁、嗜睡、肌肉量减少、肌力下降、腹部肥胖、皮肤老化、骨密度降低、记忆力减退等，从而对生活质量产生负面影响(Min,K.S.,等,2011)。

因此，作为用于改善因缺乏性激素引起的障碍及疾病的简单方法，具有激素替代疗法(hormone replacement therapy，HRT)。用于激素替代疗法的制剂可根据给药的便利性、患者的偏好度、药剂费用、患者的年龄、副作用的程度或状态等进行多种选择，给药后是否维持生理浓度或是否增加至非生理水平也是选择时的重要变量。常用的有口服剂、凝胶剂、贴剂等外用剂、注射剂，均稳定且有效，但根据给药方式或不同药剂，具有特点和优缺点(Min,K.S.,等,2011)。

由于给药最方便且价格最低廉，口服剂是最常用的制剂，但是胃肠道给药的激素被胃肠道吸收后在肝脏中代谢以迁移到血液中而起作用，在胃肠道吸收并在肝脏中代谢的过程中，生物利用度降低。为了弥补这一点而增加剂量时，会增加通过肝脏代谢产生的副产物的量，因此具有产生副作用的危险增加的风险。因此，为了防止这种情况，存在需以小剂量每天服用多次的缺点。

为了弥补表现出非生理性高血药浓度的注射剂的缺点并且给药的便利性，开发了外用剂，并且经皮给药的激素通过经由皮肤的简单的扩散过程直接流入血液流动，从而能够避免对肝脏的影响并且提高治疗效果。作为外用剂形式之一的贴剂可维持24～48小时，优点在于，在附着数天内血中激素浓度升高后维持一定的生理范围，移除贴剂时，可以在数小时内轻松降低血中激素浓度。但是，因皮肤粘附面会产生瘙痒、发红等皮肤副作用。凝胶制剂吸收适当，可以维持生理激素的浓度且易于涂抹，并且几乎没有副作用而被广泛利用。然而，具有涂抹量大的不便，并且与他人接触时，可能将药剂成分传递给对方。

注射剂是已经使用最长时间的方法，优点在于无需每天给药。然而，在注射后立即升高至非生理性高血药浓度，但在一定时间后降低至正常浓度以下，从而在短时间内表现出极大的血药浓度变化，尤其在注射后立即出现的激素的非生理性高血药浓度可能会引起严重的副作用。

为了弥补这些缺点，需开发一种制剂，其能够使给药的性激素长时间作用，并在给药后，缓慢进行性激素的释放，从而能够减少因血中激素浓度急剧上升引起的副作用。

近来，已经开发出一种将药物装载于高分子颗粒中以输送药物的系统。然而，就在高分子颗粒中混合药物和粘合剂以吸附到颗粒表面的方式而言，吸附到高分子表面的药物在初期快速释放，因此难以持续药物释放。另外，将药物浸到高分子颗粒中使得药物渗透到高分子的沉淀方法存在释放根据高分子颗粒结构而不规则的问题。

因此，本发明的发明人在开发包含药物的制剂的过程中，确认了包含类固醇类或性激素类药物的生物降解性微粒在降解期间适当释放药物，且能够调节成长期释放，从而完成了本发明。

作为现有技术，在本发明的发明人的经授权的韩国授权专利第1105292号中记载了一种用于组织再生的生物降解性高分子微粒，其通过将生物降解性聚酯类高分子溶于DMSO并喷射到低温的烃溶液以制备冷冻的DMSO微粒后，将其放入低温的盐的水溶液中以溶解DMSO而制备，然而，其在生物降解性高分子微粒中培育细胞并用作细胞载体，完全没有记载本发明的药物从包含药物的生物降解性高分子微粒中缓慢且长期释放的效果。另外，韩国公开专利第2007-0107941号中记载了一种具有生长激素持续控制释放效果的生物降解性微球组合物，但与本发明的生物降解性高分子微粒的结构及制备方法存在差异，美国授权专利第4530840号中记载了一种包含消炎剂的微粒及其制备方法，但与本发明的生物降解性高分子微粒的制备方法存在差异。

发明内容

发明要解决的问题

本发明的目的在于，提供一种包含类固醇类或类固醇类的性激素类药物的生物降解性高分子微粒及其制备方法。

用于解决问题的手段

本发明涉及一种包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒的制备方法，所述方法由如下所述的步骤构成：(a)将类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子混合物溶于有机溶剂中，以制备包含类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子的溶液；(b)将包含所述类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子的溶液喷射到温度低于有机溶剂的熔点的C5～10的烃溶液中，以制备微粒；(c)将所述微粒添加到盐的水溶液中并溶解有机溶剂，以去除有机溶剂；及(d)在去除所述有机溶剂的微粒中去除盐。

所述(a)步骤的溶解可以是以溶液为基准达到1～25％(w/v)的方式，将类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子混合物溶于有机溶剂中。

所述(a)步骤的类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子混合物可以以1:99～3:7的重量比混合类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子。

所述类固醇类药物可以是选自由地夫可特(deflazacort)、地奈德(desonide)、去羟米松(desoximetasone)、地塞米松(dexamethasone)、双氟拉松(diflorasone)、双氟可龙(diflucortolone)、二氟孕甾丁酯(difluprednate)、氯替泼诺(loteprednol etabonate)、利美索龙(rimexolone)、甲哌地强龙(mazipredone)、甲羟松(medrysone)、甲泼尼龙(methylprednisolone)、甲泼尼松(meprednisone)、糠酸莫米松(mometasone furoate)、倍氯米松(beclomethasone)、倍他米松(betamethasone)、布地奈德(budenonide)、阿尔孕酮(algestone)、阿氯米松(alclometasone)、安西奈德(amcinonide)、甘草次酸(enoxolone)、皮质酮(corticosterone)、可的松(cortisone)、可的伐唑(cortivazol)、氯泼尼松(chloroprednisone)、氯倍他索(clobetasol)、氯倍他松(clobetasone)、氯可托龙(clocortolone)、氯泼尼醇(cloprednol)、替可的松(tixocortol)、曲安西龙(triamcinolone)、曲安奈德(trianmcinolone acetonide)、苯曲安奈德(triamcinolonebenetonide)、己曲安奈德(triamcinolone hexacetonide)、帕拉米松(paramethasone)、孕烯醇酮醋酸酯(pregnenolone acetate)、泼尼卡酯(prednicarbate)、泼尼松龙(prednisolone)、泼尼松龙-25-二乙氨基醋酸酯(prednisolone 25-diethylaminoacetate)、泼尼松龙磷酸钠(prednisolone sodium phosphate)、泼尼松(prednisone)、泼尼松龙戊酸酯(prednival)、泼尼立定(prednylidene)、氟扎可特(fluazacort)、氟氯奈德(flucloronide)、氟米松(flumethasone)、氟尼缩松(flunisolide)、醋酸氟轻松(fluocinolone acetonide)、氟轻松(fluocinonide)、氟可丁酯(fluocortin butyl)、氟可龙(fluocortolone)、氟米龙(fluorometholone)、醋酸甲氟龙(fluperolone acetate)、醋酸氟泼尼定(fluprednidene acetate)、氟泼尼松龙(fluprednisolone)、丙酮缩氟氢羟龙(flurandrenolide)、丙酸氟替卡松(fluticasonepropionate)、福莫可他(formocortal)、哈西奈德(halcinonide)、卤倍他索丙酸酯(halobetasone propionate)、卤米松(halometasone)、醋酸卤泼尼松(halopredoneacetate)、氢可他酯(hydrocortamate)、氢化可的松(hydrocortisone)及性激素(sexhormone)构成的组中的一种以上。

所述性激素可以是选自由孕酮(Progesterone)、睾酮(Testosterone)、雌激素(Estrogen)、雄激素(Androgen)、雌二醇(Estradiol)、左炔诺孕酮(Levonorgestrel)、孕二烯酮(Gestoden)、去氧孕烯(Desogestrel)、地诺孕素(Dienogest)、醋酸环丙孕酮(Cyproterone acetate)及乙炔雌二醇(Ethynylestradiol)构成的组中的一种以上。

所述生物降解性聚酯类高分子可以是选自由聚乳酸(poly lactic acid，PLA)、聚乙醇酸(poly glycolic acid，PGA)、聚-D,L-丙交酯(poly-D,L-lactide，PDLLA)、聚(D,L-乳酸-羟基乙酸)共聚物(poly(D,L-lactic-co-glycolic acid)，PLGA)、聚己内酯(poly-carprolactone，PCL)、聚戊内酯(poly(valerolacton))、聚羟基丁酸酯(poly(hydroxybutylate))及聚羟基戊酸酯(poly(hydroxy valerate))构成的组中的一种以上。

所述生物降解性聚酯类高分子的重均分子量可以为10000～250000。

所述有机溶剂可以是选自由二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide，DMSO)、PCL(polycaprolactone)、氯仿(chloroform)、丙酮(acetone)、二氯甲烷(dichloromethane)、苯(benzene)、甲苯(toluene)、异丙醚(isopropyl ether)、氯苯(chlorobenzene)、碳酸乙二酯(ethylene carbonate)及乙二醇(ethylene glycol)构成的组中的一种以上。

所述(b)步骤的C5～10的烃(hydrocarbon)可以是选自由戊烷(pentane)、己烷(hexane)、庚烷(hepatane)、辛烷(octane)、壬烷(nonane)、癸烷(decane)及石油醚(petroleum ether)构成的组中的一种以上。

所述(c)步骤的盐的水溶液可以是5～30％(w/v)的NaCl或CaCl

所述包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒的直径可以是10～1000μm。

本发明涉及一种以所述制备方法制备的包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒。

另外，本发明涉及含所述包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒的消炎组合物。

本发明还涉及一种含所述包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒的类固醇类药物制剂。

作为所述类固醇类的性激素制剂可以为注射剂。

以下，详细说明本发明。

本发明涉及一种包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒的制备方法，所述方法由如下所述的步骤构成：(a)将类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子混合物溶于有机溶剂中，以制备包含类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子的溶液；(b)将包含所述类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子的溶液喷射到温度低于有机溶剂的熔点的C5～10的烃溶液中，以制备微粒；(c)将所述微粒添加到盐的水溶液中并溶解有机溶剂，以去除有机溶剂；及(d)在去除所述有机溶剂的微粒中去除盐。

通常，有机溶剂易于相互混合，因此无法将一有机溶剂喷射到另一有机溶剂(即，以A有机溶剂及B有机溶剂表示)来制备微粒。这是因为，喷射溶有高分子的A有机溶剂，在接触到B有机溶剂的瞬间，两种有机溶剂相互混合，无法将A有机溶剂冻结，因此无法制备微粒。

但是，本发明的有机溶剂和烃属于通常使用的有机溶剂，但由于极性(polarity)差异大，因此不会相互混合。另外，由于有机溶剂容易溶解类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子混合物，因此可使用，并且由于有机溶剂极易溶于水，冻结后将冻结的颗粒放入水中时，有机溶剂易于溶出，相反，溶解于有机溶剂中的生物降解性聚酯类高分子不易溶于水，因此可以以冻结于有机溶剂中的状态来制备微粒。

所述有机溶剂可以是选自由DMSO(dimethyl sulfoxide)、PCL(polycaprolactone)、氯仿(chloroform)、丙酮(acetone)、二氯甲烷(dichloromethane)、苯(benzene)、甲苯(toluene)、异丙醚(isopropyl ether)、氯苯(chlorobenzene)、碳酸乙二酯(ethylene carbonate)及乙二醇(ethylene glycol)构成的组中的一种以上。

优选是选自由DMSO、PCL及氯仿构成的组中的一种以上，更优选是选自由DMSO及氯仿构成的组中的一种以上，最优选是DMSO。然而不限于此。

通常，制备微粒的方法主要使用乳化-溶剂蒸发法(emulsification-solventevaporation)，但其制备过程复杂，如使用界面活性剂等，且调节微粒大小有限，并且难以调节微粒的孔隙率。然而，采用本发明的制备方法时，孔隙率可根据将性激素类药物及生物降解性聚酯类高分子混合物溶于有机溶剂中的浓度来确定，因此易于调节孔隙率，通过在外部以阀门调节喷射溶解有性激素类药物及生物降解性聚酯类高分子混合物的有机溶剂溶液时流出的溶液量和空气量，从而易于调节微粒大小。另外，由于通过单纯地喷射溶液来制备，因此具备工序简单且生产性优异的优点。

所述(a)步骤的溶解可以是以在(a)步骤中制备的溶液为基准达到1～25％(w/v)的方式，将类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子混合物溶于有机溶剂中。当类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子混合物低于1％(w/v)时，微粒的机械强度弱，实用性降低；超过25％(w/v)时，粘度过高，喷涂时形成纤维(fiber)等致效率性降低，因此不优选。

所述(a)步骤的类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子混合物可以以1:99～3:7的重量比混合类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子。在所述混合物中，类固醇类药物超过30重量％时，生物降解性聚酯类高分子的机械强度变弱，微粒可能变形或结块，因此不优选。

所述(b)步骤的烃(hydrocarbon)溶液是在0℃以下不结冰且能够与有机溶剂进行相分离，因此优选碳原子数5～10(C5～10)的烃。

所述C5～10的烃可以是选自由戊烷(pentane)、己烷(hexane)、庚烷(hepatane)、辛烷(octane)、壬烷(nonane)、癸烷(decane)及石油醚(petroleum ether)构成的组中的一种以上。优选为己烷。所述己烷具有高挥发性，最终在冻结干燥过程或自然干燥过程中易于去除。

在所述烃中，就碳原子数低于5个的烃而言，挥发性过大，在制备上存在困难，而碳原子数超过10个的烃，实用性低，因此不优选。

为了所述有机溶剂的冻结，所述烃溶液的温度可以为低于有机溶剂的熔点的温度。例如，当有机溶剂为DMSO时，烃的溶液的温度优选在1气压下约低于18℃的温度，更优选为-20～0℃，最优选为-10～-5℃。

所述有机溶剂的熔点可根据混合到有机溶剂中的物质的含量及种类来调节。例如，作为有机溶剂的氯仿，虽然熔点是-63.5℃，但混合有本发明的类固醇类药物及生物降解性高分子时，在-5℃也能够冻结。

所述(b)步骤的喷射中，对(a)步骤的含有类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子的溶液施加压力，并将其喷射到C5～10的烃溶液中，从而制备包含类固醇类药物的微粒。

本发明中所使用的喷射方式包括使用常用的喷嘴，只要是能够调节喷射空气的量且调节被喷射的包含类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子的溶液的量来喷射到烃溶液的方法，则可以没有限制地使用。优选向低温流体(cryogenic fluid)内的喷射方式。

所述喷射可在0.2～20.0g/分钟的范围内对包含类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子的溶液的喷射量进行各种调节，并在1.0～30.0L/分钟的范围内对喷射空气量进行各种调节，从而容易地调节所制备的微粒的大小。

在所述(b)步骤中制备的微粒可通过相分离及冷冻，维持其形状并且能够以冷冻状态沉淀。冷冻微粒的大部分是为了溶解类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子混合物而使用的有机溶剂，为了在微粒中去除有机溶剂，通过以下步骤利用盐的水溶液来溶出有机溶剂。

所述(c)步骤的盐的水溶液优选在0℃以下也能够维持不冻结的状态。为了去除有机溶剂可使用水，但为了微粒的稳定性，优选以0℃以下的盐的水溶液去除有机溶剂。

所述盐的水溶液可以为NaCl或CaCl

所述盐的水溶液的温度可以为-20～0℃。当温度低于-20℃时，盐的水溶液会冻结而无法使用，当超过0℃时，制备时微粒的稳定性变差，所制备的微粒彼此聚集，导致生产性降低。

所述(d)步骤的盐的去除是，去除为了去除微粒的有机溶剂而在(c)步骤中使用的盐的水溶液导致存在于微粒中的盐。

所述盐的去除可以以添加过量的水，优选去离子蒸馏水(deionized distilledwater)稀释的方法来进行去除。

本发明的包含药物的生物降解性高分子微粒的制备方法采用了用于溶解类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子的有机溶剂和作为冷却有机溶剂的烃的相分离性质，制备方法具有比现有的方法简单且效率以及量产工序简单的特征。另外，能够易于调节微粒的大小，可以以注射注入到生物体内。

所述类固醇类药物可以是地夫可特、地奈德、去羟米松、地塞米松、双氟拉松、双氟可龙、二氟孕甾丁酯、氯替泼诺、利美索龙、甲哌地强龙、甲羟松、甲泼尼龙、甲泼尼松、糠酸莫米松、倍氯米松、倍他米松、布地奈德、阿尔孕酮、阿氯米松、安西奈德、甘草次酸、皮质酮、可的松、可的伐唑、氯泼尼松、氯倍他索、氯倍他松、氯可托龙、氯泼尼醇、替可的松、曲安西龙、曲安奈德、苯曲安奈德、己曲安奈德、帕拉米松、孕烯醇酮醋酸酯、泼尼卡酯、泼尼松龙、泼尼松龙-25-二乙氨基醋酸酯、泼尼松龙磷酸钠、泼尼松、泼尼松龙戊酸酯、泼尼立定、氟扎可特、氟氯奈德、氟米松、氟尼缩松、醋酸氟轻松、氟轻松、氟可丁酯、氟可龙、氟米龙、醋酸甲氟龙、醋酸氟泼尼定、氟泼尼松龙、丙酮缩氟氢羟龙、丙酸氟替卡松、福莫可他、哈西奈德、卤倍他索丙酸酯、卤米松、醋酸卤泼尼松、氢可他酯、氢化可的松、性激素等，但不限于此。

所述类固醇类药物优选可以是选自由地夫可特、地奈德、去羟米松、地塞米松、双氟拉松、双氟可龙、二氟孕甾丁酯、氯替泼诺、利美索龙、甲哌地强龙、甲羟松、甲泼尼龙、甲泼尼松、糠酸莫米松、倍氯米松、倍他米松、布地奈德、阿尔孕酮、阿氯米松、安西奈德、甘草次酸、皮质酮、可的松、可的伐唑、氯泼尼松、氯倍他索、氯倍他松、氯可托龙、氯泼尼醇、替可的松、曲安西龙、曲安奈德、苯曲安奈德、己曲安奈德、帕拉米松、孕烯醇酮醋酸酯、泼尼卡酯、泼尼松龙、泼尼松龙-25-二乙氨基醋酸酯、泼尼松龙磷酸钠、泼尼松、泼尼松龙戊酸酯、泼尼立定、氟扎可特、氟氯奈德、氟米松、氟尼缩松、醋酸氟轻松、氟轻松、氟可丁酯、氟可龙、氟米龙、醋酸甲氟龙、醋酸氟泼尼定、氟泼尼松龙、丙酮缩氟氢羟龙、丙酸氟替卡松、福莫可他、哈西奈德、卤倍他索丙酸酯、卤米松、醋酸卤泼尼松、氢可他酯、氢化可的松及性激素构成的组中的一种以上。

所述性激素可使用本领域所使用的所有性激素类药物，优选可以是选自由孕酮(Progesterone)、睾酮(Testosterone)、雌激素(Estrogen)、雄激素(Androgen)、雌二醇(Estradiol)、左炔诺孕酮(Levonorgestrel)、孕二烯酮(Gestoden)、去氧孕烯(Desogestrel)、地诺孕素(Dienogest)、醋酸环丙孕酮(Cyproterone acetate)及乙炔雌二醇(Ethynylestradiol)构成的组中的一种以上。更优选是选自由孕酮、睾酮、雌二醇、雌激素及乙炔雌二醇构成的组中的一种以上。

本发明的生物降解性聚酯类高分子作为脂肪族聚酯类高分子，是选自由聚乳酸(poly lactic acid，PLA)、聚乙醇酸(poly glycolic acid，PGA)、聚-D,L-丙交酯(poly-D,L-lactide，PDLLA)、聚(D,L-乳酸-羟基乙酸)共聚物(poly(D,L-lactic-co-glycolicacid)，PLGA)、聚己内酯(poly-carprolactone，PCL)、聚戊内酯(poly(valerolacton))、聚羟基丁酸酯(poly(hydroxy butylate))、聚羟基戊酸酯(poly(hydroxy valerate))及它们的衍生物构成的组中的一种以上。优选是选自由聚乳酸、聚乙醇酸、聚-D,L-丙交酯、聚(D,L-乳酸-羟基乙酸)共聚物及它们的衍生物构成的组中的一种以上，更优选为聚-D,L-丙交酯或聚(D,L-乳酸-羟基乙酸)共聚物。

所述生物降解性聚酯类高分子的重均分子量可以为10000～250000。然而，本发明的微粒制备方法具有能够易于制备球形的微粒的特征和易于控制微粒的大小的特征，不会因为生物降解性聚酯类高分子的重均分子量而限制微粒大小的控制。

本发明的包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒的直径可根据有机溶剂溶液状的类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子的浓度、向烃溶液喷射时溶液喷射量及喷射空气量来适当地调节。具体地，包含类固醇类药物及生物降解性聚酯类高分子的溶液内的生物降解性聚酯类高分子的浓度越高，向烃溶液喷射时的溶液喷射量越多，向烃溶液喷射时的喷射空气量越少，直径越大。

所述包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒直径可以为10～1000μm。

所述包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒可使类固醇类药物在体内长期缓慢释放。例如，注射现有的类固醇类药物时，会出现注射后血液内类固醇类或性激素数值急剧增加后再急剧减少。就类固醇类药物而言，为了治疗效果反复使用高剂量，从而出现对药物的耐药性及副作用。当类固醇类药物为性激素类药物时，由于血液内急剧的数值变化，会出现性欲减退、情绪波动反复的现象，并且会出现因血液内性激素浓度的急剧增加引起的肝毒性等副作用。然而。注射本发明的包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒时，生物降解性高分子微粒在血液内缓慢分解，可以防止血液内类固醇类或性激素浓度的急剧增加，并且在生物降解性高分子微粒的分解过程中类固醇类药物或性激素适当地长时间缓慢释放，从而可通过一次给药表现出长时间的治疗效果(long acting effect)。因此，通过利用本发明的包含药物的生物降解性高分子微粒，通过一次注射就能够长时间释放适当量的类固醇类药物或性激素，可减少短期反复给药的不便，并防止因类固醇类药物或性激素浓度的急剧变化引起的副作用。

在所述包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒中的类固醇类药物的释放会根据生物降解性高分子存在差异。例如，就本发明的生物降解性高分子之一的聚(D,L-乳酸-羟基乙酸)共聚物而言，根据乳酸和羟基乙酸的比例，生物降解的时间存在差异，具体地，乳酸和羟基乙酸的比例为85:15时，为5～6个月，75:25时，为4～5个月，65:35时，为3～4个月，50:50时，为1～2个月(Velasco,M.A,等,2015)。

本发明的所述包含药物的生物降解性高分子微粒可释放最少1个月的类固醇类药物。

本发明的包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒可以包含的方式进行培育细胞，从而还可以用作可注射形式的细胞载体。

本发明还提供以所述制备方法制备的包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒。

另外，本发明提供含所述包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒的消炎组合物或性激素制剂。

所述消炎组合物可以是含包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒及药剂学赋形剂的预防或治疗炎症疾病用药学组合物。

所述性激素制剂是含包含作为所述类固醇类的性激素类药物的生物降解性高分子微粒及药剂学赋形剂的可预防或治疗因性激素不足或缺乏而引起的症状及疾病的药学组合物。

所述药学组合物可根据各自的常规方法剂型化成散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、悬浮液、乳剂、糖浆、气溶胶等的口服剂型、外用剂、栓剂及灭菌注射溶液的形式来使用。可包含于所述药学组合物中的载体、赋形剂及稀释剂可举出乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、赤藓醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯胶、海藻酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁及矿物油。制剂化时，使用通常使用的填充剂、增重剂、结合剂、湿润剂、崩解剂、表面活性剂等的稀释剂或赋形剂来调剂。用于胃肠道给药的固体制剂包括片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂等，这种固体制剂在本发明的所述包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒中混合至少一种以上的赋形剂来调剂，例如，淀粉、碳酸钙、蔗糖或乳糖、明胶等。另外，除单纯的赋形剂之外，还使用如硬脂酸镁、滑石粉等润滑剂。用于口服的液状制剂有悬浮剂、口服液剂、乳剂、糖浆等，除通常使用的单纯稀释剂的水、液体石蜡之外，还包含各种赋形剂，例如，润湿剂、甜味剂、芳香剂、防腐剂等。用于胃肠道外给药的制剂包括灭菌的水溶液、非水溶剂、悬浮剂、乳剂、冻结干燥制剂、栓剂。非水溶剂、悬浮剂可使用如丙二醇、聚乙二醇、橄榄油的植物油，如油酸乙酯的可注射的酯等。作为栓剂的基质，可以使用维比索尔(witepsol)、聚乙二醇、吐温(tween)61、可可脂、月桂酸甘油脂、甘油明胶等。

本发明的药学组合物的给药量可根据接受治疗的对象的年龄、性别、体重、疾病的病理状态、病理状态的严重程度、给药途径及处方人员的判断而不同。

本发明的药学组合物可以以多种途径向老鼠、家畜及人等哺乳动物进行给药。给药的所有方式可预测，例如，可通过口服、直肠或静脉、肌肉、皮下、皮肤、子宫内膜、脑血管注射、局部给药来进行给药。

所述炎症疾病可以是过敏性疾病、炎性肠病、动脉粥样硬化、炎性胶原血管疾病、肾小球肾炎、炎性皮肤病、结节病、视网膜炎、胃炎、肝炎、肠炎、关节炎、偏桃腺炎、咽喉炎、支气管炎、肺炎、胰腺炎、败血症、压疮、退行性慢性炎性疾病、肾炎、钙化性肌腱炎、肩袖撕裂、五十肩、退行性关节炎等，但不限于此。

所述药学组合物可表现出免疫力调节或消炎效果。

所述性激素制剂优选为注射剂。

由于所述性激素的不足或缺乏而出现的症状及疾病，女性有月经不调和痛经、月经周期不规则、肾脏及乳房发育不良、皮肤问题、性欲低下及性冷淡、阴道收缩力减少、更年期障碍提前及更年期障碍、皮肤老化、抑郁症、神经过敏、性交痛、尿失禁、阴道分泌物减少、绝经、骨质疏松、不孕等，男性有性欲下降、性功能下降、疲劳、抑郁、嗜睡、肌肉量减少、肌力下降、腹部肥胖、皮肤老化、骨密度降低、记忆力减退等。然而不限于此。

发明效果

本发明涉及包含药物的生物降解性高分子微粒及其制备方法，将类固醇类药物和生物降解性聚酯类高分子溶于适当的有机溶剂中并喷射至低温的烃溶液中，以制备冷冻的微粒后，将其放入低温的盐的水溶液中，以溶解包含在微粒中的有机溶剂，通过上述制备方法制备了包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒，并确认到所制备的包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒具有优异的生物相容性、生物降解性、多孔性及机械强度等，类固醇类药物可缓慢且长期释放。

由此可期待，利用本发明的包含药物的生物降解性高分子微粒，可通过一次注射，适当地长期持续释放至少一个月以上的药物，以治疗因性激素的减少或缺乏而产生的症状及疾病，并且开发能够最小化副作用的药物传递系统。

附图说明

图1示出用电子显微镜观察根据本发明的制备方法制备的包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒的大小的结果(x200；高分子溶液4.2％(w/v)；高分子溶液喷射量：1.0g/分钟；喷射空气量：5L/分钟)。

图2示出用电子显微镜观察根据本发明的制备方法制备的包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒的外形的结果(x5000；高分子溶液4.2％(w/v)；高分子溶液喷射量：1.0g/分钟；喷射空气量：5L/分钟)。

图3示出用电子显微镜观察根据本发明的制备方法制备的包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒的表面的结果(x10000；高分子溶液4.2％(w/v)；高分子溶液喷射量：1.0g/分钟；喷射空气量：5L/分钟)。

图4示出用电子显微镜观察根据本发明的制备方法制备的包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒的内部结构的结果(x500；高分子溶液4.2％(w/v)；高分子溶液喷射量：1.0g/分钟；喷射空气量：5L/分钟)。

图5示出用电子显微镜观察根据本发明的制备方法制备的包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒(孕酮、睾酮、PLGA50:50)的大小的结果(x1000；高分子溶液12.0％(w/v)；高分子溶液喷射量：1.0g/分钟；喷射空气量：5L/分钟)。

图6示出用电子显微镜观察根据本发明的制备方法制备的包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒(孕酮、睾酮、PLGA50:50)的外形的结果(x3000；高分子溶液12.0％(w/v)；高分子溶液喷射量：1.0g/分钟：喷射空气量：5L/分钟)。

图7示出用电子显微镜观察根据本发明的制备方法制备的包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒(孕酮、睾酮、PLGA50：50)的表面的结果(x8000；高分子溶液12.0％(w/v)；高分子溶液喷射量：1.0g/分钟；喷射空气量：5L/分钟)。

图8示出用电子显微镜观察根据本发明的制备方法制备的包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒(孕酮、睾酮、PLGA50：50)的内部结构的结果(x300；高分子溶液12.0％(w/v)；高分子溶液喷射量：1.0g/分钟；喷射空气量：5L/分钟)。

图9示出用电子显微镜观察根据本发明的制备方法制备的包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒(乙炔雌二醇、PLGA50：50)的大小的结果(x1000；高分子溶液12.0％(w/v)；高分子溶液喷射量：1.0g/分钟；喷射空气量：5L/分钟)。

图10示出用电子显微镜观察根据本发明的制备方法制备的包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒(乙炔雌二醇、PLGA50：50)的外形的结果(x2000；高分子溶液12.0％(w/v)；高分子溶液喷射量：1.0g/分钟；喷射空气量：5L/分钟)。

图11示出用电子显微镜观察根据本发明的制备方法制备的包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒(乙炔雌二醇、PLGA50：50)的表面的结果(x3000；高分子溶液12.0％(w/v)；高分子溶液喷射量：1.0g/分钟；喷射空气量：5L/分钟)。

图12示出用电子显微镜观察根据本发明的制备方法制备的包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒(乙炔雌二醇、PLGA50：50)的内部结构的结果(x1500；高分子溶液12.0％(w/v)；高分子溶液喷射量：1.0g/分钟；喷射空气量：5L/分钟)。

图13示出用电子显微镜观察根据本发明的制备方法制备的包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒(孕酮、睾酮、PDLLA)的大小的结果(x1000：高分子溶液9.0％(W/V)：高分子溶液喷射量：1.0g/分钟；喷射空气量：5L/分钟)。

图14示出用电子显微镜观察根据本发明的制备方法制备的包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒(孕酮、睾酮、PDLLA)的外形的结果(x2500；高分子溶液9.0％(w/v)；高分子溶液喷射量：1.0g/分钟；喷射空气量：5L/分钟)。

图15示出用电子显微镜观察根据本发明的制备方法制备的包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒(孕酮、睾酮、PDLLA)的表面的结果(x5000；高分子溶液9.0％(w/v)；高分子溶液喷射量：1.0g/分钟；喷射空气量：5L/分钟)。

图16示出用电子显微镜观察根据本发明的制备方法制备的包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒(孕酮、睾酮、PDLLA)的内部结构的结构(x2500；高分子溶液9.0％(w/v)；高分子溶液喷射量：1.0g/分钟；喷射空气量：5L/分钟)。

图17示出用电子显微镜观察根据本发明的制备方法制备的包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒(乙炔雌二醇、PDLLA)的大小的结果(x1000；高分子溶液9.0％(w/v)；高分子溶液喷射量：1.0g/分钟；喷射空气量：5L/分钟)。

图18示出用电子显微镜观察根据本发明的制备方法制备的包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒(乙炔雌二醇、PDLLA)的外形的结果(x3000；高分子溶液9.0％(w/v)；高分子溶液喷射量：1.0g/分钟；喷射空气量：5L/分钟)。

图19示出用电子显微镜观察根据本发明的制备方法制备的包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒(乙炔雌二醇、PDLLA)的表面的结果(x4000；高分子溶液9.0％(w/v)；高分子溶液喷射量：1.0g/分钟；喷射空气量：5L/分钟)。

图20示出用电子显微镜观察根据本发明的制备方法制备的包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒(乙炔雌二醇、PDLLA)的内部结构的结果(x700；高分子溶液9.0％(w/v)；高分子溶液喷射量：1.0g/分钟；喷射空气量：5L/分钟)。

图21示出用HPLC观察的在实施例4中制备的包含性激素类药物的高分子微粒(乙炔雌二醇、PLGA50：50)是否与纯药物(乙炔雌二醇)和包含于在实施例4中制备的的药物(乙炔雌二醇)相同的结果。

图22示出用HPLC观察的在实施例4中制备的包含性激素类药物的高分子微粒(乙炔雌二醇、PLGA50：50)在不同时间段的药物释放行为的结果。

具体实施方式

以下，详细说明本发明的优选实施例。然而，本发明不限于本文说明的实施例，可以以其他形式具体化。而所述实施例提供目的在于，使本文介绍的内容更彻底且完整，并将本发明的思想充分传达给本领域技术人员。

作为类固醇类药物，使用了消炎药曲安西龙(triamcinolone)，作为生物降解性聚酯类高分子，使用了聚乳酸-羟基乙酸共聚物(poly(lactic-coglycolic acid)，PLGA)，作为有机溶剂，使用了DMSO(dimethyl sulfoxide：二甲基亚砜)。

将1g的曲安西龙及20g的重均分子量为110000且乳酸和羟基乙酸的比例为75:25的PLGA溶于500mL的DMSO中，制备了4.2％(w/v)的药物及生物降解性高分子混合溶液。将所述药物及生物降解性高分子混合溶液以1.0g/分钟的溶液喷射量、5.0L/分钟的喷射空气的量的条件喷射到冷却至-5℃的正己烷(n-hexane)中，喷射的药物及生物降解性高分子混合溶液在低温的正己烷中冷冻成球形，形成微粒。

收取冷冻的微粒，将其放置到冷却至-20℃的1000mL的25％(w/v)NaCI水溶液中72小时，溶解DMSO成分后，过滤，从而获得去除DMSO的药物及混合有生物降解性高分子的微粒。将所获得的微粒再次用5000mL的蒸馏水洗涤过滤，以去除残留DMSO及NaCl后，冻结干燥，从而制备本发明的包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒。

为了确认在所述实施例1中制备的包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒的物理特性，用电子显微镜拍摄了微粒的大小、颗粒形状、颗粒表面、颗粒内部，并在图1中示出其结果。

另外，检测投入的高分子的量与最终所收取的微粒的量的比例来计算包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒的制备收率，并在下表1中示出其结果。

[表1]

如图1及所述表1所示，确认了在所述实施例1中制备的包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒的大小为100μm以下。

另外，如图2所示，所述图2是观察在所述实施例1中制备的包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒的外形的结果，所制备的微粒的外形为球形，观察图3的微粒表面的结果，确认了所制备的微粒为多孔性。进而，如图4所示，所述图4为观察所制备的微粒的内部的结果，确认了内部为空心。

由此可知，根据本发明的包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒的制备方法制备的微粒的大小是适合以注射器进行体内给药的大小，从收率来看，具有经济性。

当本发明的类固醇类药物为性激素时，为了制备包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒，作为性激素类药物，使用了孕酮(Progesterone，Tokyo Chemical industry公司，CAS.NO.57-83-0/C

混合下表2中记载的性激素类药物、生物降解性高分子及DMSO(dimethylsulfoxide)，制备了药物及生物降解性高分子混合溶液。将所述药物及生物降解性高分子混合溶液以1.0g/分钟的溶液喷射量、5.0L/分钟的喷射空气的量的条件喷射到冷却至-5℃的正己烷(n-hexane)中，喷射的药物及生物降解性高分子混合溶液在低温的正己烷中冷冻成球形，以形成微粒。

收取冷冻的微粒，将其放置到冷却至-20℃的1000mL的25％(w/v)NaCI水溶液中72小时，溶解DMSO成分后，过滤，从而获得去除DMSO的混合有药物及生物降解性高分子的微粒。将所获得的微粒再次用5000mL的蒸馏水洗涤过滤，以去除残留DMSO及NaCl后，冻结干燥，从而制备本发明的包含类固醇类药物的生物降解性高分子微粒。

[表2]

为了确认所述实施例3～6的包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒的物理特性，用电子显微镜拍摄了微粒的大小、颗粒形状、颗粒表面、颗粒内部，并在图5～图20中示出其结果。

另外，用筛分仪(CISA，100μm sieve)过筛后检测投入的高分子的量与最终所收取的微粒的量的比例来计算包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒的制备收率，并在下表3中示出其结果。

[表3]

如图5、9、13、17及所述表3所示，确认了在所述实施例3～6中制备的包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒的大小为100μm以下。

另外，如图6、10、14、18所示，所述图6、10、14、18为观察在所述实施例3～6中制备的包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒的外形的结果，所制备的微粒的外形为球形，观察图7、11、15、19微粒表面的结果，确认了所制备的微粒为多孔性。进而，如图8、12、16、20所示，所述图8、12、16、20为观察所制备的微粒的内部的结果，确认了内部为空心。

由此可知，根据本发明的包含性激素类药物的生物降解性高分子微粒的制备方法制备的微粒的大小是适合以注射器进行体内给药的大小，从收率来看，具有经济性。

确认了在所述实施例3～6中制备的包含性激素类药物的高分子微粒(乙炔雌二醇、PLGA50：50)是否与纯药物(乙炔雌二醇)和包含于在实施例4中制备的微粒中的药物(乙炔雌二醇)相同。

分别将0.1g的纯药物(乙炔雌二醇)和0.1g的在实施例4中制备的PLGA放入10mL的生理盐水中，用振动筛(Shaker roller)混合10余分钟后，在37℃恒温箱中存放12小时后，使用HPLC(HP 1260，液相色谱仪/ACN80:水20/1.0mL(min)/20μL/25℃/275nm)检测药物的特性，并在图21中示出其结果。如图21所示，确认了药物(雌二醇)和包含于实施例4PLGA中的药物(乙炔雌二醇)是相同的成分。

为了检测所述实施例4中制备的包含性激素类药物的高分子(乙炔雌二醇、PLGA50：50)的不同时段的药物释放行为，将1g的PLGA放入10mL的生理盐水中，放置在振动筛(Shaker roller)上，以50rpm按照不同时段萃取药物1mL，此时，更换全部溶剂以确保药物释放的准确性。使用HPLC(HP 1260，液相色谱仪/ACN 80:水20/1.0mL(min)/20μL/25℃/275nm))检测不同时段的药物的释放行为，并在下图22中示出其结果。如图22所示，可确认到本发明的不同时段药物释放是以适当水平进行释放的，没有初期的快速释放。

如上所述，本发明使用以DMSO溶解高分子的混合溶液制备微粒，在微粒形成时高分子和药物结合，从而具有药物根据高分子分解速度和药物的含量以适当水平释放的药物释放特性，相比于现有的在高分子颗粒上混合药物和粘合剂使其吸附到颗粒表面的方式或将高分子颗粒浸入药物中使其渗透到高分子中的方式，可根据高分子分解速度和药物含量适当地释放药物。