一种动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定方法

摘要

本发明公开一种动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定方法，针对不同动物源性食品中氯霉素、甲砜霉索和氟甲砜素残留，分别采用乙腈、乙酸乙酯‑乙醚或乙酸乙酯提取，提取液用固相萃取柱进行净化，液相色谱‑质谱/质谱仪测定，氯霉素采用内标法定量，样品中化合物质量色谱峰的保留时间与标准溶液的保留时间相比在允许偏差士2.5％之内；相对丰度偏差不超过表3的规定，则可判断样品中存在相虚的目标化合物，氯霉索、甲砜霉素和氟甲砜器素混合标准工作溶液的液相色谱‑质谱/质谱多反应监测，然后利用计算公式对氯霉素的具体数值进行精确的计算可得到。本发明解决了在很多动物源性食品中会添加氯霉素类药，氯霉素类药超标的话，可能会引起对动物的伤害的问题。

说明书

技术领域

本发明涉及铅含量的测定技术领域，具体为一种动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定方法。

背景技术

食品，指各种供人食用或者饮用的成品和原料以及按照传统既是食品又是中药材的物品，但是不包括以治疗为目的的物品。对食品的定义为：可供人类食用或饮用的物质，包括加工食品，半成品和未加工食品，不包括烟草或只作药品用的物质。

氯霉素类药是适用于由氯霉素可引起严重的毒副作用的一类药品。功效是抑制细菌。在很多动物源性食品中会添加氯霉素类药，氯霉素类药超标的话，可能会引起对动物的伤害，因此，我们设计了一种动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定方法。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定方法，解决了在很多动物源性食品中会添加氯霉素类药，氯霉素类药超标的话，可能会引起对动物的伤害的问题。

为了达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：一种动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定方法，包括以下步骤，

(1)准备试剂并对试剂进行配制；

(2)对试样进行制备；

(3)提取动物组织与水产晶；

(4)对动物组织与水产品进行净化处理；

(5)采用计算公式对氯霉素类药物残留量进行结果计算。

前述的一种动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定方法，所述步骤 (1)中，乙腈饱和正己烷：取200mL正己烷于250mL分液漏斗中，加入少量乙腈,剧烈振摇,静置分层后,舍去下层乙腈层,

丙酮-正己烷：丙酮、正己烷按体积比1:9混匀，

丙-正己烷：丙酮、正已烷按体积比3:7混匀；乙酸乙酯-乙醚：75mL 乙酸乙酯与25mL乙醚溶液混匀；

乙酸钠缓冲液(0.1mol/L)：称取乙酸钠13.6g于1000mL容量瓶中，加入980mL水溶解并混匀，用乙酸调pH到5.0，定容至刻度混匀；

乙酸铵溶液(10mmol/L)：称取乙酸0.77g于1000mL容量瓶中，用水定容至刻度混匀；

标准储备溶液：分别准确称取适量的氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜素标准物质，乙腈配成500pg/mL的标准储备溶液；

氯素、甲砜霉素和氯甲砜翁家标准中间溶液：分别准确移取适量的氯素、甲砜霉素和甲砜素标准储备溶液，乙腈稀释成50pg/mL的氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素标准中间溶液；

氯霉素、甲砜素和氟甲素混合标准工作溶液：分别准确移取适量的氯符素、甲霖素和氟甲霖素标准中间溶液，用流动相稀释成合适的混合标准工作溶液；

氯霉素-D储备溶液：准确称取适量的氯霉素-D，标准物质，乙腈配成 100pg/mL的标准储备溶液。

前述的一种动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定方法，所述步骤(2)中，从原始样品中取出部分有代表性样品，经高速组织捣碎机均匀捣碎或混匀，用四分法缩分出适量试样，均分成两份，装入清洁容器内，加封后作出标记，一份作为试样，一份作为留样。

前述的一种动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定方法，所述步骤 (3)中，称取试样5g，置于50mL离心管中，加人100pL氯霉索-D，工作溶液和30mL乙腈，匀浆，离心5min，将上清液移入250mL分液漏斗中，加15mL 乙腈，饱和的正已烷，振荡5min，静置分层，转移乙腈层至100mL棕色心形瓶中，残渣中再加入30mL乙腈，振摇3min，离心5min，取上清液转移至同一分液漏斗，振荡5min，静置分层，转移乙腈层至同一棕色心形瓶中，向心形瓶中加人5mL正丙醇，于40℃水浴中旋转蒸发近干，用氮气吹干，加5mL 丙酮-正己烷溶解残渣。

前述的一种动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定方法，所述步骤 (3)中，用5mL丙酮-正己烷淋洗LC-Si硅胶小柱，弃去淋洗液，将残渣溶解溶液，转移到固相萃取小柱上，弃去流出液，用5mL丙酮-正已烷洗脱，收集洗脱液于心形瓶中，40℃水，浴中旋转蒸发至近干，氮气吹干，用1mL水定容，定容液过0.45jm滤膜至进样瓶，待测定。

前述的一种动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定方法，所述步骤 (4)中，试样中目标化合物残留量使用仪器数据处理系统或氯霉素残留量按式(2)计算，

X-试样中待测组分残留量，单位为微克每千克(pg/kg)；

c-标准工作溶液的浓度，单位为纳克每毫升(ng/mL)；

c

c

A

A-样液中待测目标物的峰面积；

A

V-试样定容体积，单位为毫升(mL)；

w-样品称样量，单位为克(g)。

本发明的有益效果为：本装置在工作时，针对不同动物源性食品中氯霉素、甲砜霉索和氟甲砜素残留，分别采用乙腈、乙酸乙酯-乙醚或乙酸乙酯提取，提取液用固相萃取柱进行净化，液相色谱-质谱/质谱仪测定，氯霉素采用内标法定量，然后利用计算公式对氯霉素的具体数值进行精确的计算可得到。

附图说明

图1为本发明的流程图；

图2为本发明采用乙腈提取后氯霉素的药物残留量；

图3为本发明采用乙酸乙酯-乙醚提取后氯霉素的药物残留量；

图4为本发明采用乙酸乙酯提取后氯霉素的药物残留量。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

参看图1-4：一种动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定方法，包括以下步骤，

(1)准备试剂并对试剂进行配制；

(2)对试样进行制备；

(3)提取动物组织与水产晶；

(4)对动物组织与水产品进行净化处理；

(5)采用计算公式对氯霉素类药物残留量进行结果计算。

优选的，步骤(1)中，乙腈饱和正己烷：取200m正己烷于250m分液漏斗中，加入少量乙腈,剧烈振摇,静置分层后,舍去下层乙腈层,

丙酮-正己烷：丙酮、正己烷按体积比1:9混匀，

丙-正己烷：丙酮、正已烷按体积比3:7混匀；乙酸乙酯

-乙醚：75mL乙酸乙酯与25mL乙醚溶液混匀；

乙酸钠缓冲液(0.1mol/L)：称取乙酸钠13.6g于1000mL容量瓶中，加入980mL水溶解并混匀，用乙酸调pH到5.0，定容至刻度混匀；

乙酸铵溶液(10mmol/L)：称取乙酸0.77g于1000mL容量瓶中，用水定容至刻度混匀；

标准储备溶液：分别准确称取适量的氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜素标准物质，乙腈配成500pg/mL的标准储备溶液；

氯素、甲砜霉素和氯甲砜翁家标准中间溶液：分别准确移取适量的氯素、甲砜霉素和甲砜素标准储备溶液，乙腈稀释成50pg/mL的氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素标准中间溶液；

氯霉素、甲砜素和氟甲素混合标准工作溶液：分别准确移取适量的氯符素、甲霖素和氟甲霖素标准中间溶液，用流动相稀释成合适的混合标准工作溶液；

氯霉素-D储备溶液：准确称取适量的氯霉素-D，标准物质，乙腈配成 100pg/mL的标准储备溶液。

优选的，步骤(2)中，从原始样品中取出部分有代表性样品，经高速组织捣碎机均匀捣碎或混匀，用四分法缩分出适量试样，均分成两份，装入清洁容器内，加封后作出标记，一份作为试样，一份作为留样。

优选的，步骤(3)中，称取试样5g，置于50mL离心管中，加人100pL 氯霉索-D，工作溶液和30mL乙腈，匀浆，离心5min，将上清液移入250mL分液漏斗中，加15mL乙腈，饱和的正已烷，振荡5min，静置分层，转移乙腈层至100mL棕色心形瓶中，残渣中再加入30mL乙腈，振摇3min，离心5min，取上清液转移至同一分液漏斗，振荡5min，静置分层，转移乙腈层至同一棕色心形瓶中，向心形瓶中加人5mL正丙醇，于40℃水浴中旋转蒸发近干，用氮气吹干，加5mL丙酮-正己烷溶解残渣。

优选的，步骤(3)中，用5mL丙酮-正己烷淋洗LC-Si硅胶小柱，弃去淋洗液，将残渣溶解溶液，转移到固相萃取小柱上，弃去流出液，用5mL丙酮-正已烷洗脱，收集洗脱液于心形瓶中，40℃水，浴中旋转蒸发至近干，氮气吹干，用1mL水定容，定容液过0.45jm滤膜至进样瓶，待测定。

优选的，步骤(4)中，试样中目标化合物残留量使用仪器数据处理系统或氯霉素残留量按式(2)计算，

X-试样中待测组分残留量，单位为微克每千克(pg/kg)；

c-标准工作溶液的浓度，单位为纳克每毫升(ng/mL)；

c

c

A

A-样液中待测目标物的峰面积；

A

V-试样定容体积，单位为毫升(mL)；

w-样品称样量，单位为克(g)。

综上，本发明在使用时，针对不同动物源性食品中氯霉素、甲砜霉索和氟甲砜素残留，分别采用乙腈、乙酸乙酯-乙醚或乙酸乙酯提取，提取液用固相萃取柱进行净化，液相色谱-质谱/质谱仪测定，氯霉素采用内标法定量，样品中化合物质量色谱峰的保留时间与标准溶液的保留时间相比在允许偏差士2.5％之内；待测化合物定性商子对的重构离子色谱峰的信噪比大于或等于 3(S/N≥3)，定量离子对的重构离子色谱峰的信噪比大于或等于10(S/N≥10)；氯霉索、甲砜霉素和氟甲砜器素混合标准工作溶液的液相色谱-质谱/质谱多反应监测，然后利用计算公式对氯霉素的具体数值进行精确的计算可得到。

以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。