人参中特有化合物精氨酸双糖苷AFG的高效分离制备新方法

摘要

精氨酸双糖苷(AFG，C18H34N4O12)是人参在加工过程中产生的一种美拉德反应产物，其中在红参中含量高达3～4％，是红参的标志性成分之一。研究发现，AFG具有明显的药理活性，开发前景广阔。本发明提供了一种提取精氨酸双糖苷AFG的新方法，具体涉及利用醋酸水溶液和一定量的三氯化铁代替蒸馏水提取的方法。该方法中，醋酸作为易挥发的成分，不会对后续分离纯化产生影响，且对人体无伤害，三氯化铁也易过滤除去，抑制了AFG的水解，提高了AFG提取率，简化了提取步骤，节约了成本，利于产业化应用。

说明书

技术领域

本发明涉及一种从人参及其相关加工品中提取、分离与制备特征性化合物的方法，具体说是一种从红参中高效分离制备化合物精氨酸双糖苷AFG的方法及应用。

背景技术

人参为传统名贵药材，在《神农本草经》中被列为上品。AFG是鲜人参在加工蒸制成为红参的过程中，发生的梅拉德反应产物，郑毅男

目前，AFG主要提取方法为红参粉末用高浓度乙醇萃取，去上清，沉淀水提醇沉，然后过阳离子树脂柱分离得。但此方法杂质偏多，且后续过阳离子树脂需要用到氨水溶液洗脱，氨水溶液味道较为刺激，对人体和环境有一定得危害。

而本发明使用水饱和正丁醇作为萃取液不仅能把皂苷除去，还能除糖除色素等各种杂质弥补了现有分离方法的不足，且后续用醋酸水溶液混合一定量的三氯化铁代替乙醇溶液制备AFG简化了步骤并提高了提取率，同时抑制了AFG的分解，安全环保，无刺激气味，通过多次试验结果表明以此方法提取AFG纯度增加，其操作简单，且节约成本，安全环保。

本发明内容

本发明公开一种从红参中高效提取AFG的方法，为一种新的提取方法：红参粉末用水饱和正丁醇萃取除去杂质，沉淀用有机酸(醋酸)水溶液混合一定量的三氯化铁超声提取，滤液醇沉过硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，具有操作简易，安全环保，提取率高，产物刺激性小和稳定性高等特点。

本发明通过以下技术方案来实现：

一种高效提取精氨酸双糖苷(AFG)的方法，具体包括如下步骤：人参相关加工品粉末用水饱和正丁醇萃取，得沉淀，再用含有一定量的三氯化铁的pH为4.5～5的醋酸水溶液去超声提取，过滤，从滤液中获得精氨酸双糖苷。

作为本发明的一种优选技术方案：所述人参相关加工品包括但不限于红参，人参根、西洋参根及其非药用部位(如：茎叶、果实)，优选红参。

作为本发明的一种优选技术方案：人参相关加工品粉末重量与醋酸水溶液体积的比，按g/mL为1：10。

作为本发明的一种优选技术方案：人参相关加工品粉末重量与三氯化铁质量的比，按照g/g为1：0.3。

作为本发明的一种优选技术方案：前述方法进一步包括：滤液用无水乙醇沉淀，抽滤去除上清液，沉淀过硅胶柱，用70％乙醇水溶液洗脱，收集各部分洗脱液，合并富含AFG成分的洗脱液，浓缩后继续过聚丙烯酰胺凝胶柱，用0.2％醋酸水溶液洗脱，收集富含AFG的洗脱液，浓缩冷冻干燥即得AFG。

作为本发明的一种优选技术方案：人参相关加工品粉末用水饱和正丁醇萃取包括：人参相关加工品粉末过80目筛，粉末加入到水饱和正丁醇中，萃取3次，离心，过滤，去除上清液，人参相关加工品粉末重量与水饱和正丁醇体积的比，按g/mL为1：100。

通过大量的实验研究发现，AFG在酸性条件下比较稳定，优选pH值为4.0-6.0的酸性水溶液，酸浓度太高或太低均会影响红参中AFG的提取与分离，优选醋酸的酸性溶液。更为重要的是，与一定量的三氯化铁组合能提高AFG的提取率并增加物质的稳定性，可使AFG的提取率提高30-50％。

本发明提取物通过HPLC分析法测试计算出AFG的纯度可达98％以上，从红参中提取AFG的得率可达2％-4％。

作为本发明的一种优选技术方案：本发明精氨酸双糖苷的提取方法，包括以下步骤：

将人参相关加工品粉末(80目)用水饱和正丁醇搅拌过夜，离心，过滤，去除上清液，得沉淀，再用pH为4.5的醋酸水溶液混合一定量的三氯化铁去超声提取，过滤，去除不溶部分，滤液用无水乙醇沉淀，抽滤去除上清液，沉淀过200-300硅胶柱，用70％乙醇水溶液洗脱，收集各部分洗脱液，合并富含AFG成分的洗脱液，浓缩后继续过聚丙烯酰胺凝胶柱，用0.2％醋酸水溶液洗脱，收集富含AFG的洗脱液，浓缩冷冻干燥即得AFG。

作为本发明的一种优选技术方案：1g红参粉末，置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，沉淀置于10mL的pH为4.5的醋酸水溶液混合0.3g的三氯化铁中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG。作为其优选技术方案：提取液用无水乙醇沉淀，抽滤去除上清液，沉淀过硅胶柱，用70％乙醇水溶液洗脱，收集各部分洗脱液，合并富含AFG成分的洗脱液，浓缩后继续过聚丙烯酰胺凝胶柱，用0.2％醋酸水溶液洗脱，收集富含AFG的洗脱液，浓缩冷冻干燥即得AFG。

本发明相对于现有技术的积极效果在于：

本发明中，首次使用水饱和正丁醇作为萃取媒介，醋酸水溶液混合一定量的三氯化铁作为提取溶剂提取AFG，提取率可以达到3.5％以上，同时降低了提取成本，且安全环保，提取率高。

以水饱和正丁醇为萃取媒介，沉淀中皂苷、多糖和色素残留量少，易于后续分离提纯；以pH为4.5的醋酸水溶液混合一定量的三氯化铁提取AFG，抑制了AFG的水解，提高了AFG提取率，简化了提取步骤，节约了成本。

最为重要的是，醋酸作为易挥发的成分，不会对后续分离纯化产生影响，且对人体无伤害，三氯化铁也易过滤除去，增加了AFG的稳定性，使提取率得以增加。

附图说明：

附图1：最终产物中AFG含量测定示意图。

参考文献

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具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步详细的举例描述，但发明的实施方式不限于此。

除另有说明外：

本发明使用红参粉末(AFG含量约为4.28％)，生晒参粉末(AFG含量约为1.25％)，人参果粉末(AFG含量约为0.14％)，西洋参粉末(AFG含量约为0.15％)。

本发明实施例硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱洗脱条件为：沉淀过200-300硅胶柱，用70％乙醇水溶液洗脱，收集各部分洗脱液，合并富含AFG成分的洗脱液，浓缩后继续过聚丙烯酰胺凝胶柱，用0.2％醋酸水溶液洗脱，收集富含AFG的洗脱液，浓缩冷冻干燥即得AFG。

实验例一 不同原料提取AFG

1.1按人参相关加工品粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置入10倍量pH为4.5的醋酸水溶液混合0.3g的三氯化铁进行超声提取，提取液醇沉后，过硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

1.1.1按上述条件使用1g红参粉末(AFG含量约为4.28％)提取AFG，置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，沉淀置于10mL的pH为4.5的醋酸水溶液混合0.3g的三氯化铁中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

1.1.2使用1g生晒参粉末(AFG含量约为1.25％)提取AFG，置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，沉淀置于10mL的pH为4.5的醋酸水溶液混合0.3g的三氯化铁中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

1.1.3沉使用1g人参果粉末(AFG含量约为0.14％)提取AFG，置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，沉淀置于10mL的pH为4.5的醋酸水溶液混合0.3g的三氯化铁中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

1.1.4使用1g西洋参粉末(AFG含量约为0.15％)提取AFG，置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，沉淀置于10mL的pH为4.5的醋酸水溶液混合0.3g的三氯化铁中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

1.2AFG提取物中精氨酸的检测

1.2.1检测方法：运用柱前衍生高效液相色谱法进行检测，检测1.1粗提取物和最终AFG中精氨酸残留量。

1.2.2精氨酸标准品制备：精密称取分析级精氨酸10.0mg，加色谱级甲醇定容至10mL，即浓度为1mg/mL；备用。

1.2.3样品制备：每组分别精密称取50.0mg，按照氨基酸衍生法进行衍生检测。

1.2.4色谱条件：Venusil--AA氨基酸分析专用柱(5μm，4.6mm×250mm)。流动相A:乙酸钠缓冲溶液-乙腈溶液(pH＝6.5)；流动相B:乙腈水溶液V(乙腈):V(水)＝4：1。0min，0％B；4min，3％B；16min，10％B；17min，20％B；32min，34％B；30min；流速1.0mL/min；检测波长254nm；柱温40℃；进样量20μL。

结果见表1，红参组与其他组相比，AFG提取率较高。

表1：不同原料提取AFG对比

由表1可以总结出，从红参中提取AFG，最终AFG得率高。

实验例二 不同溶剂提取红参中的AFG

2.1按红参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置入10倍量以下溶剂进行超声提取，提取液醇沉后，过硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

2.1.1按上述条件萃取完后，沉淀置于10mL的pH为4.5的醋酸水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

2.1.2按上述条件萃取完后，沉淀置于10mL水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

2.1.3按上述条件萃取完后，沉淀置于10mL的pH为9的氨水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

检测方法如1.2所示。

结果见表2，醋酸水溶液组与蒸馏水组和氨水溶液组比，AFG提取率较高并且纯度最高。

表2：不同溶剂提取红参中的AFG对比

由表2可以总结出，以醋酸水溶液从红参中提取AFG，最终AFG得率较大提升，纯度也是最高，酸性条件抑制了AFG的分解，增加其稳定性。

实验例三 不同酸性溶剂提取红参中的AFG

3.1按红参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置入10倍量以下溶剂进行超声提取，提取液醇沉后，过硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

3.1.1按上述条件萃取完后，沉淀置于10mL的pH为5的醋酸水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

3.1.2按上述条件萃取完后，沉淀置于10mL的pH为5的柠檬酸水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

3.1.3按上述条件萃取完后，沉淀置于10mL的pH为5的苹果酸水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

检测方法如1.2所示。

结果见表3；醋酸水溶液组与柠檬酸水溶液组和苹果酸水溶液组比，提取率较高。

表3：不同酸性溶剂提取红参中的AFG对比

由表3可以总结出，三种酸性溶剂均能提高提取率和AFG得率，但醋酸水溶液组与柠檬酸水溶液组和苹果酸水溶液组比，提取率和AFG得率更高。

实验例四 不同pH的醋酸水溶液提取红参中的AFG

4.1按红参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置入10倍量以下溶剂进行超声提取，提取液醇沉后，过硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

4.1.1按上述条件萃取完后，沉淀置于10mL的pH为4的醋酸水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

4.1.2按上述条件萃取完后，沉淀置于10mL的pH为4.5的醋酸水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

4.1.3按上述条件萃取完后，沉淀置于10mL的pH为5的醋酸水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

4.1.4按上述条件萃取完后，沉淀置于10mL的pH为5.5的醋酸水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

4.1.5按上述条件萃取完后，沉淀置于10mL的pH为6的醋酸水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

检测方法如1.2所示。

结果见表4，pH为4.5的醋酸水溶液组与其他组比，提取率较高。

表4：不同pH的醋酸水溶液提取红参中的AFG对比

由表4可以总结出，pH为4.5的醋酸水溶液为最佳提取溶剂，提取率和AFG得率最高。

实验例五 不同量的三氯化铁混合pH为4.5的醋酸水溶液提取红参中的AFG

5.1按红参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置入10倍量以下溶剂进行超声提取，提取液醇沉后，过硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

5.1.1按上述条件萃取完后，沉淀置于10mL的pH为4.5的醋酸水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

5.1.2按上述条件萃取完后，沉淀置于10mL的pH为4.5的醋酸水溶液中并混合0.1g的三氯化铁固体，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

5.1.3按上述条件萃取完后，沉淀置于10mL的pH为4.5的醋酸水溶液中并混合0.3g的三氯化铁固体，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

5.1.4按上述条件萃取完后，沉淀置于10mL的pH为4.5的醋酸水溶液中并混合0.5g的三氯化铁固体，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AFG，称量计算得率并检测纯度。

检测方法如1.2所示。

结果见表5，pH为4.5的醋酸水溶液中混合0.3g的三氯化铁组与其他组比，提取率较高。

表5：不同量的三氯化铁混合对红参中的AFG提取的比较结果

由表5可以总结出，pH为4.5的醋酸水溶液中混合0.3g的三氯化铁为最佳比例，提取率和AFG得率最高。

实施例1

精确称量红参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置于10mL的pH为4.5的冰醋酸水溶液中并混合0.3g的三氯化铁固体，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱收集含AFG洗脱液，浓缩冻干计算AFG得率为3.81％，最终AFG纯度大于98.5％。

实施例2

精确称量生晒参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置于10mL的pH为4.5的冰醋酸水溶液中并混合0.3g的三氯化铁固体，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱收集含AFG洗脱液，浓缩冻干计算AFG得率为0.94％，最终AFG纯度大于98.5％。

实施例3

精确称量人参果粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置于10mL的pH为4.5的冰醋酸水溶液中并混合0.3g的三氯化铁固体，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱收集含AFG洗脱液，浓缩冻干计算AFG得率为0.09％，最终AFG纯度大于98.5％。

实施例4

精确称量西洋参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置于10mL的pH为4.5的冰醋酸水溶液中并混合0.3g的三氯化铁固体，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱收集含AFG洗脱液，浓缩冻干计算AFG得率为0.11％，最终AFG纯度大于98.5％。

实施例5

精确称量红参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置于10mL的pH为4.5的醋酸水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱收集含AFG洗脱液，浓缩冻干计算AFG得率为2.61％，最终AFG纯度大于98.5％。

实施例6

精确称量红参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置于10mL的水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱收集含AFG洗脱液，浓缩冻干计算AFG得率为1.44％，最终AFG纯度为97.8％。

实施例7

精确称量红参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置于10mL的pH为9的氨水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱收集含AFG洗脱液，浓缩冻干计算AFG得率为0.49％，最终AFG纯度为96.2％。

实施例8

精确称量红参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置于10mL的pH为5的醋酸水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱收集含AFG洗脱液，浓缩冻干计算AFG得率为2.52％，最终AFG纯度大于98.5％。

实施例9

精确称量红参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置于10mL的pH为5的柠檬酸水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱收集含AFG洗脱液，浓缩冻干计算AFG得率为2.37％，最终AFG纯度大于98.5％。

实施例10

精确称量红参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置于10mL的pH为5的苹果酸水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱收集含AFG洗脱液，浓缩冻干计算AFG得率为2.19％，最终AFG纯度大于98.5％。

实施例11

精确称量红参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置于10mL的pH为4的醋酸水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱收集含AFG洗脱液，浓缩冻干计算AFG得率为2.49％，最终AFG纯度大于98.5％。

实施例12

精确称量红参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置于10mL的pH为4.5的醋酸水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱收集含AFG洗脱液，浓缩冻干计算AFG得率为2.61％，最终AFG纯度大于98.5％。

实施例13

精确称量红参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置于10mL的pH为5的醋酸水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱收集含AFG洗脱液，浓缩冻干计算AFG得率为2.52％，最终AFG纯度大于98.5％。

实施例14

精确称量红参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置于10mL的pH为5.5的醋酸水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱收集含AFG洗脱液，浓缩冻干计算AFG得率为2.42％，最终AFG纯度大于98.5％。

实施例15

精确称量红参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置于10mL的pH为6的醋酸水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱收集含AFG洗脱液，浓缩冻干计算AFG得率为2.37％，最终AFG纯度大于98.5％。

实施例16

精确称量红参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置于10mL的pH为4.5的冰醋酸水溶液中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱收集含AFG洗脱液，浓缩冻干计算AFG得率为2.61％，最终AFG纯度大于98.5％。

实施例17

精确称量红参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置于10mL的pH为4.5的冰醋酸水溶液中并混合0.1g的三氯化铁固体，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱收集含AFG洗脱液，浓缩冻干计算AFG得率为3.13％，最终AFG纯度大于98.5％。

实施例18

精确称量红参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置于10mL的pH为4.5的冰醋酸水溶液中并混合0.3g的三氯化铁固体，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱收集含AFG洗脱液，浓缩冻干计算AFG得率为3.81％，最终AFG纯度大于98.5％。

实施例19

精确称量红参粉末(80目)1.0g置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，所得沉淀置于10mL的pH为4.5的冰醋酸水溶液中并混合0.5g的三氯化铁固体，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200-300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱收集含AFG洗脱液，浓缩冻干计算AFG得率为3.26％，最终AFG纯度大于98.5％。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。