用于检测埃立克体的Eva Green荧光定量PCR试剂盒及检测方法

摘要

本发明属于埃立克体(Ehrlichia)检测技术领域，涉及用于检测埃立克体的Eva Green荧光定量PCR试剂盒和检测方法。本发明基于反刍动物埃立克体(Ehrlichia ruminantium)16S RNA提供了Eva Green荧光定量PCR引物，其如SEQ ID NOs 1‑6所示。本发明还提供了包含所述引物的Eva Green荧光定量PCR试剂盒。本发明提供的检测埃立克体的Eva Green荧光定量PCR方法，包括以下步骤：(1)提取待测样品中的DNA；(2)Eva Green荧光定量PCR：以步骤(1)提取的DNA为模板，并采用前述引物，进行Eva Green荧光定量PCR；(3)分析Eva Green荧光定量PCR扩增产物。本发明的检测方法特异性好，与牛巴贝斯虫、牛双芽巴贝斯虫等无交叉反应；对16S RNA质粒标准品的最低检测限为1.32拷贝·μL‑1，与套式PCR检测方法相比，敏感性更高。