一种复方甘草酸单铵S冻干粉针剂及制备方法

摘要

本发明涉及药物技术领域，提出了一种复方甘草酸单铵S冻干粉针剂，包括以下组分：甘草酸单铵S 20mg～200mg/瓶、盐酸半胱氨酸10mg～140mg/瓶、甘氨酸200mg～2000mg/瓶、亚硫酸氢钠0.1％～0.5％/瓶、注射用水组成。通过上述技术方案，解决了现有技术中的长期稳定性差，过滤困难问题。

说明书

技术领域

本发明涉及药物技术领域，具体的，涉及一种复方甘草酸单铵S冻干粉针剂及制备方法。

背景技术

复方甘草酸单铵S在临床上主要用于急、慢性肝炎引起的肝功能异常；对中毒性肝炎有一定的辅助治疗作用；亦可用于食物中毒、药物中毒、药物过敏等。目前常规生产在配制过程中，必须加入一定量的活性炭进行吸附处理，以去除产品可能存在的细菌内毒素或热源，如专利《一种复方甘草酸单铵S注射液药物组合物及其制备方法和应用》(申请号201810631109.3)、《一种注射用复方甘草酸单铵S及其制造方法》(201811035966.3)等都均加入了活性炭进行吸附处理，以去除药液中的热原或细菌内毒素。同时，由于活性炭的加入，需加入金属离子络合剂如依地酸二钠或中和，增加了药液中的金属离子的种类和量。药液在活性炭吸附处理过程中，不仅向药液中引入了新的杂质，如细菌内毒素或热原、金属离子(如铁离子、钙离子、锌离子等)、有毒物质(如氯离子、硫酸根离子、硫化物、氰化物等)、重金属(如铅、铬、汞等)、活性炭粉未等，造成药液二次污染，而且活性炭本身为细小颗粒，通过脱炭过滤和深层过滤，无法彻底去除，造成除菌过滤滤芯和药液的污染，增加了微生物污染风险。

甘草酸单铵S在结构分为18α-H、18β-H两种结构，而甘草酸单铵S以18β-H结构为主，直接配制成复方甘草酸单铵S药液，存在过滤困难的问题，对于本问题的解决，目前尚无明确报道。

同时，目前市面上的复方甘草酸单铵S的质量参差不齐，存在稳定性差的问题，多数药剂都是通过往其中加入稳定剂来实现的，这些稳定剂的一方面会导致注射液中不溶性微粒的增加，另一方面又存在一些潜在的副作用。

发明内容

本发明提出一种复方甘草酸单铵S冻干粉针剂及制备方法，解决了现有技术中的上述问题。

本发明的技术方案如下：

一种复方甘草酸单铵S冻干粉针剂，包括以下组分：甘草酸单铵S 20mg～200mg/瓶、盐酸半胱氨酸10mg～140mg/瓶、甘氨酸200mg～2000mg/瓶、亚硫酸氢钠0.1％～0.5％/瓶、注射用水组成。

作为进一步的技术方案，所述的一种复方甘草酸单铵S冻干粉针剂，还包括缬氨酸50mg～500mg/瓶，组氨酸100mg～1000mg/瓶。

本发明还提出一种复方甘草酸单铵S冻干粉针剂的制备方法，包括以下步骤：

S1、称量配料；

S2、配制溶液搅拌至溶解；

S3、加入PH调节剂调节PH至7～7.5；

S4、加入注射用水定容到50000ml，搅拌均匀；

S5、深层过滤、除菌过滤得无菌过滤液；

S6、灌装，装量为5ml/瓶；

S7、充氮气，负压，冻干；

S8、轧盖得复方甘草酸单铵S冻干粉针剂；

S9、目检。

作为进一步的技术方案，所述的PH值调节剂包括盐酸、氢氧化钠、柠檬酸、氢氧化钾中的一种或几种。

作为进一步的技术方案，所述的一种复方甘草酸单铵S冻干粉针剂的制备方法，在配制、过滤、灌装、冻干及冻干复压过程中，均充入氮气保护。

作为进一步的技术方案，所述的一种复方甘草酸单铵S冻干粉针剂的制备方法，在每次生产前，对配液系统、灌装系统等物料接触设备、管道等器具进行碱液处理和灭菌处理。

作为进一步的技术方案，所述碱液处理包括：注射用水冲洗、碱液清洗、注射用水冲洗至中性，其中碱液浓度为0.1％～10％，处理时间30min～24小时，所用碱包括氢氧化钠、氢氧化钾等强碱。

作为进一步的技术方案，所述灭菌处理的方法为：采用纯蒸汽进行在线或离线灭菌，F0值不小于15，灭菌后正压保存，压力0.05～0.2MPa，有效时限0～48小时。

根据所述的任意一种复方甘草酸单铵S冻干粉针剂在治疗药物中的应用。

本发明的有益效果为：

1、利用本发明生产的复方甘草酸单铵S冻干粉针剂具有易过滤、成品含量稳定、杂质水平低、可见异物、不微性微粒少等特点，更有利于提高临床用药安全，同时对肝脏纤维化的治疗效果较好。

2、本发明通过控制原辅料、设备的细菌内毒素或热原、微生物，去除了活性炭吸附操作，在处方中取消了金属离子络合剂，较少了其他杂质，微生物污染；通过调节PH值，解除溶液的胶束状态，形成水溶液，解决了过滤困难的问题。

3、本发明通过添加缬氨酸和组氨酸，与其他组分协同作用，协助清除对人体有害的自由基，增加了复方甘草酸单铵S的肝脏纤维化损伤的治疗效果。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都涉及本发明保护的范围。

实施例1

处方如下：

制备方法：

对配液系统、灌装系统等物料接触设备、管道等器具进行射用水冲洗、碱液清洗、注射用水冲洗至中性，后采用纯蒸汽进行在线或离线灭菌，灭菌要求F0值不小于15，灭菌后正压保存，压力0.05～0.2MPa，有效时限0～48小时。

对所有原辅料进行细菌内毒素或热原检测。取适量甘草酸单铵S，加氢氧化钠调节pH至6.0～7.0，搅拌使溶解，加入氯化钠溶液制成2mg/ml的0.9％氯化钠溶液，按照热原检查法(家兔法)检测，应合格；取盐酸半胱氨酸适量，加0.9％氯化钠溶液制成每1mL中含15mg的溶液，按照热原检查法(家兔法)检测，应合格；取甘氨酸适量，利用鲎试剂进行检测，每1g甘氨酸中含细菌内毒素的量应小于20EU；注射用水为无色澄清液体，取本品适量，利用鲎试剂进行检测，每1mL中含内毒素的量应小于0.25EU。

在配液罐中加入适量注射用水，通入氮气；称取处方量甘草酸单铵S投入配液罐中，加入氢氧化钠或盐酸调节pH7；加入称量后的盐酸半胱氨酸、甘氨酸、亚硫酸氢钠投入配液罐中，搅拌至全溶；加入注射用水定容到50000ml，搅拌均匀；通过深层过滤、除菌过滤得无菌过滤液；灌装，装量为5ml/瓶；冻干(充氮气复压)、轧盖得复方甘草酸单铵S冻干粉针剂。

实施例2

处方如下：

制备方法与实施例1不同的是称取处方量甘草酸单铵S投入配液罐中，加入氢氧化钠或盐酸调节pH7.5，其他相同。

实施例3

处方如下：

制备方法与实施例1不同的是取处方量甘草酸单铵S投入配液罐中，加入氢氧化钠或盐酸调节pH7.3，其他相同。

实施例4

处方如下：

制备方法：

对配液系统、灌装系统等物料接触设备、管道等器具进行射用水冲洗、碱液清洗、注射用水冲洗至中性，后采用纯蒸汽进行在线或离线灭菌，灭菌要求F0值不小于15，灭菌后正压保存，压力0.05～0.2MPa，有效时限0～48小时。

对所有原辅料进行细菌内毒素或热原检测。取适量甘草酸单铵S，加氢氧化钠调节pH至6.0～7.0，搅拌使溶解，加入氯化钠溶液制成2mg/ml的0.9％氯化钠溶液，按照热原检查法(家兔法)检测，应合格；取盐酸半胱氨酸适量，加0.9％氯化钠溶液制成每1mL中含15mg的溶液，按照热原检查法(家兔法)检测，应合格；取甘氨酸适量，利用鲎试剂进行检测，每1g甘氨酸中含细菌内毒素的量应小于20EU；取缬氨酸适量，利用鲎试剂进行检测，每1g缬氨酸中含细菌内毒素的量应小于20EU；取组氨酸适量，利用鲎试剂进行检测，每1g组氨酸中含细菌内毒素的量应小于20EU；注射用水为无色澄清液体，取本品适量，利用鲎试剂进行检测，每1mL中含内毒素的量应小于0.25EU。

在配液罐中加入适量注射用水，通入氮气；称取处方量甘草酸单铵S投入配液罐中，加入氢氧化钠或盐酸调节pH7；加入称量后的盐酸半胱氨酸、甘氨酸、缬氨酸、组氨酸、亚硫酸氢钠投入配液罐中，搅拌至全溶；加入注射用水定容到50000ml，搅拌均匀；通过深层过滤、除菌过滤得无菌过滤液；灌装，装量为5ml/瓶；冻干(充氮气复压)、轧盖得复方甘草酸单铵S冻干粉针剂。

实施例5

处方如下：

制备方法与实施例4不同的是所用无花果蛋白酶进行利用鲎试剂进行检测，每1g无花果蛋白酶中含细菌内毒素的量应小于20EU，称取处方量甘草酸单铵S投入配液罐中，加入氢氧化钠或盐酸调节pH7.5，其他相同。

实施例6

处方如下：

制备方法与实施例4不同的是称取处方量甘草酸单铵S投入配液罐中，加入氢氧化钠或盐酸调节pH7.3，其他相同。

对比例1

处方如下：

制备方法：

在配液罐中加入适量注射用水，通入氮气；称取处方量甘草酸单铵S投入配液罐中，加入氢氧化钠或盐酸调节pH6.02；加入称量后的盐酸半胱氨酸、甘氨酸、亚硫酸氢钠投入配液罐中，搅拌至全溶；加入注射用水定容到50000ml，搅拌均匀，加入0.02％的活性炭，搅拌吸附30min；通过脱炭过滤去除活性炭；再经深层过滤、除菌过滤得无菌过滤液；灌装，装量为5ml/瓶；冻干(充氮气复压)、轧盖得复方甘草酸单铵S冻干粉针剂。

对比例2

处方如下：

制备方法与实施例6不同的是除去缬氨酸，其他相同。

相关实验测试及数据如下：

表1过滤速度对比表

检测方法：

1.溶液的澄清度与颜色：取本品1支，加水10ml溶解，溶液应澄清无色。

2.可见异物：采用带遮光板的日光灯，光照度3000lx，正面不反光的黑色面作为检查无色或白色异物的背景；侧面和底面的白色面作为检查有色异物的背景；取供试品5支(瓶)，加水溶解；置供试品于遮光板边缘处，在明视距离(指供试品至人眼的清晰观测距离，通常为25cm)，分别在黑色和白色背景下，手持供试品颈部使药液轻轻旋转和翻转容器使药液中存在的可见异物悬浮(但应避免产生气泡)，轻轻翻摇后即用目检视，重复3次，总时限为20秒。在静置一段时间后轻轻旋转时均不得检出烟雾状的微柱，且不得检出金属屑、玻璃屑、长度或最大粒径超过2mm的纤维和块状物等明显可见异物。微细可见异物(如点状物、2mm以下的短纤维和块状物等)如有检出，除另有规定外，应分别符合下列规定：

3.不溶性微粒：采用光阻法进行检测，每个供试品容器(份)中含10μm及10μm以上的微粒不得过6000粒，含25μm及25μm以上的微粒不得过600粒。

4.热原：取本品1瓶，加0.9％氯化钠注射液溶解，制成每ml含甘草酸单铵S mg的水溶液，依家兔法检查，剂量按家兔体得每1kg注射2ml，应符合规定。

5.重金属：取纳氏比色管2支，编号甲、乙。取供试品适量，加氢氧化钠试液5ml与水20ml溶解后，置甲管中，加硫化钠试液5滴，摇匀，即得。一定量的标准铅溶液(精密称取在105℃干燥至恒重的硝酸铅0.1599g，置1000ml量瓶中，加硝酸5ml与水50ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于10μg的Pb)。本液仅供当日使用。加氢氧化钠试液5ml与水20ml溶解后，置乙管中，加硫化钠试液5滴，摇匀，即得。将制备的甲管溶液颜色与乙管比较，不得更深。

6.有关物质：照高效液相色谱法测定

色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂，乙腈-0.01mol/L醋酸铵(350：650)，用冰醋酸调节pH为3.5为流动相，检测波长为252nm，理论板数按甘草酸单铵峰计算，应不低于1000，甘草酸单铵峰和相邻物质峰的分离度应符合规定。

检测法：取本品适量，精密称定，用水配制成每1ml中约含1.0mg的溶液，滤过，取续滤液作为供试品溶液，取20μl,注入液相色谱仪，记录色谱力至主峰保留时间的2倍，供试品溶液的色谱图中除溶剂峰和主峰外，其它所有峰都计为有关物质，有关物质峰面积之和不得大于总峰面积的16.0％。

7.含量：照高效液相色谱法测定

色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂，乙腈-0.01mol/L磷酸溶液(38：62)为流动相，检测波长为252nm,理论板数按甘草酸单铵峰计算，应不低于2000，甘草酸单铵峰和内标物质峰的分离度应符合规定。

内标溶液的制备：取对羟基苯甲酸丁酯约70mg，精密称定，置100ml量瓶中，以稀乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀。

对照品溶液的制备：取甘草酸单铵对照品约20mg，精密称定，置100ml量瓶中，加稀乙醇溶解，并精密加入内标溶液5ml,以稀乙醇稀释至刻度，摇匀。

供试品溶液的制备：取品适量(含甘草酸单铵约20mg),精密称定，罡100ml量瓶中，加稀乙醇溶解，并精密加入内标溶液5ml,以稀乙醇稀释至刻度，摇匀。

测定法：分别精密吸取供试品溶液与对照品溶液各5μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按内标法以峰面积计算甘草酸单铵含量。

表2检测结果

8.长期稳定性实验：在温度40℃士2℃、相对湿度75％士5％的条件下放置6个月，以产品的澄清度与颜色、可见异物、不溶性微粒、有关物质为检测指标，进行产品的质量对比。

表3澄清度与颜色检测结果对比表

表4可见异物检测结果对比表

表5不溶性微粒检测结果对比表

表6有关物质检测结果对比表

从上述数据可以看出，实施例6是本发明所述实施例中综合性能相对较好的实施例。对比例1经过活性炭处理，过滤速度较慢，同时，本发明实施例通过调节PH，解决了生产过程中的过滤困难的问题。本发明的实施例的长期存放稳定性都较好，其他杂质少，而实施例6通过添加缬氨酸和组氨酸，长期存放稳定性没有变差，反而有所变好。

9.动物实验

选择小鼠60只，按随机数字表法分为A组-正常对照组、B组-溶剂对照组、C组-模型对照组、D组-实施例3、E组-实施例6、F组-对比例2。A组：10只大鼠，常规饲养，不作其它处理，于第8周结束后处死3只大鼠，其它大鼠共饲养14周。B组：10只大鼠，腹腔注射花生油(0.15ml/只/次)，每周3次，共14周，于第8周结束后处死3只大鼠。C组：10只大鼠，腹腔注射CCl

动物实验结束后，试管编号，对摘眼球取血法取血，置于未加抗凝剂的普通干净玻璃试管中，静置使其充分凝固，离心分离血清，置于-20℃条件下保存，剖开小白鼠暴露肝脏，留取肝脏右叶，其它肝脏组织部分保存待检。对各组小白鼠的肝功能指标(ALT、AST和ALB)变化情况进行检测，对新鲜肝脏组织的SOD、MDA和Hyp的比较。数据采用Mean±SD表示，使用SPSS12.0统计软件统计分析。

首先比较A组第八周和模型组的大鼠，模型组大鼠肝脏大体观色泽偏暗，表面油腻、欠光滑，体积未见明显变化，肝脏边缘变纯，质地较实，有结节感；血清ALT、AST、HA、LN、PC-Ⅲ明显升高；病理切片观察有较多纤维生成，证实肝纤维化形成，造模成功。

表7功能指标

本实施例6组的ALT和AST下降最为明显，MDA和Hyp上升明显，SOD下降幅度最大，幅度均大于实施例2和对比例2，其治疗相关肝脏纤维化损伤的效果最为明显，治疗效果也最好，表明将缬氨酸、组氨酸复配，并添加无花果蛋白酶，加入混合制剂中可以增强复方甘草酸单铵S的治疗效果。

以上仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。