技术领域
本发明涉及生物技术领域,具体是一种抑制LncRNA-RP5表达的试剂在制备治疗小细胞肺癌药物中的用途。
背景技术
肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,也是致死率最高的肿瘤。2018全球癌症统计,有大约1810万新增癌症病例和960万癌症患者死亡,其中肺癌占所有新发癌症病例的11.6%,占所有癌症总死亡人数的18.4%。从病理分型上,肺癌有可分为小细胞肺癌(smallcelllungcancer,SCLC)和非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)。其中小细胞肺癌(smallcelllungcancer,SCLC)是一种神经内分泌肿瘤,占全部肺恶性肿瘤的15%~20%,其恶性程度高、侵袭性强、易复发和转移的特点限制了患者的长期生存,是一种预后极差的恶性肿瘤。所以,提供一种能够有效改善预后的治疗小细胞肺癌药物是非常有必要的。
发明内容
本发明就是为了解决现有技术中存在的问题,所提出了一种抑制LncRNA-RP5表达的试剂在制备治疗小细胞肺癌药物中的用途。
本发明采用了如下的技术方案。
一种抑制LncRNA-RP5表达的试剂在制备治疗小细胞肺癌药物中的用途。
进一步的,所述LncRNA-RP5序列如下所示(SEQ ID NO.1):
ATCTTCTGCTTCACCCCATGCTCGGTCCCTGAGCCAGTTCTGTCATTGGTTCTTTCAGACCAGGGCAGGAAAAGTCAAGAAAGCAAAAGCGGATTCTAGGCTGTGGGGTTTGCTGTTTGCTAGCCCCCTGGCAGAGATGCCTGTCCTTGCAGTCCTGAACTGGTGGCCAAGTGTGCATGCATGCACGTGCAGGTGTGTGCATGTGCAGGTGTGCATGCGTGTATGTGCGCACACACATTCATGCTTGTACATGTTTGTGTACACGCACACTTTTTTCTGCTTTCAATTTCAAGCTGTTGCCTCCCTGATGTGTCTGTTTAGTGACTTGAGCCAGAAAGATTCCCGGTTCTATGTGGGATGAGAATGAACGCAGGCAGGTCTCCACAGAAGTGAGTAAAGTAGAGCTGAGAAGAAGGACATTGTCTCATGCCAGCCTGTCCAATAGCCACTTTGCCCCAGCCCTGCCTCAAGCCCCAGAGAGATGACAAGGCTCTCTCTGTTTGTCGACTCCTTGAAGCTCAGAAAGGTGGGTCAAGAGGTGCCCGTCAAGCGTTTAGGCAAGCACAGGACCCTGATCTTTACTAAGTCTCCACATCTCTCTTGCACAGCCCTGGGCTCAGGGCTTGGTCCCCTCTGGGCAGGCCATCCAGACTAAGTGACAGTCAGATTGTGTGTGGGGAGGCTAGAGACATCCATTCTTCATGGATCAGCCTGAATGGCTGGACAGATCTTGCAAATGGATTGTGTAAGACAGAGTGTGGAAGAGGAGGCTGTGATCAGTGGCTTGGAGAGCAGAGTGTGGTCAGGCGCTAAACCTAAGGCTTTTCTGGGAAGAGCTGTTAAGATTAGACTGTTCTCCCAAAAAGCCAATAATTCTGAGTGTCTCCATTAATGCCTAGGTAGCCCATACTCTCACCCAGCCGGTGCCCTTCAGCCTGGAACCTTTGGATGGAGGATTGGACCTTGTGACCTTCAAGTTCCCTTCCGAACCAAATATGCTCTAACCCAGGAGATGGTGCTGTTGCCCAGGAAGCCGGTCACCATGACGAGAGTACCCGCTCAGATGAGGATGCAGGCGGAGGCGGTGAAGGTGCTGGAGGCCAGGATGCTGAGGTAGCTGCTCCTCTCCACCAGGGTCCAGATGCCCATGGCCAGGACAGCTGCCCCCCTGACCTGCAGGAGACCACCAGGTTGGAGCAGGGGGTGGCGGGGGCCTCAGGAGCTGCCATTCCTTGAGTGCCCGCTGGGTACCAGGCACTTCTCGTGCATTGTCTTATTCAATTTAGGCCTCCTAAGAGCCTGTGAGAACAGTGTGGTGGCCTAGCTTTACAGATGAGGAAACGGAGGCTGAGAGAGGTTTGCAGGCTTGTCCAAGGTCACACATGTAAGCGAGCTGCAGATTTTGAATCTGGGTCTGACTTCTGATTCTGTGCATCTTACTATGGTTCCTACTGCATATGAGGCGGGGAGAAATGACTTCAGTTTTGGGGATGACTAATATACCTGAGTCCCTTCGCCTCCCCTCCCCTCAGAGCGCTCCCTCCCTCTGTCCACGTTTCCCTGATGGATGTGGAGGTGCCATTTTGAGCACCTCCCCTTGTTCAATCCTTATATTTGCCCATTGGGGAAGCACGGCTGGGCCCCTTATCCCTCCCTGTTCTACAGAGGAAGGAACTGAGGCCCATGGAGGAGAGGTAAATGGCCCGAGTTAGGGGCAGGGCCAGGACCAGGACTCAGAGCCCAGGGCCTGCTTGCTCAGTCTCGCTGCCTCCATGATGGAAGGGCCACTGTGCTGGACAAGTTGGAGCTCCCTGGGACCACAGGAGGAGGGAGGAGAGCCTTCTTTGCTGTCTGACTCCCTTTCAGTCCTGAGAGGGGGCAGGGACGGGACACTGCTGATTTGCAGGTCTGGGGGATGCCTTCTTGGAAATAGAGTACCTGGGAAATGTAGCTGGGGTGGTGGGGCTTGACTGTTCTTTCCTGCCATGAAGCTGAGGAGCCTTTTAGTGACTGTTATCCTCAGCAGAGCATAGTGGGTGGGTGCAAGTGTCCTCAAGGTGCCAGATGGGGGCTGTTTGGAGTGTTTTCCCAGGATTTGGGTCCTCTGGGACCTCTGACCATCTCTGTCATTTGCTCCTGGGAAGGTGGACTTCTGTCTCCCAGTCTCTCTGCCCGCCATTTAGGGACGGGTCCATTTCCTCTGATGGTCAGTAGATGCTTCCTCAAGGGGTCTTGGGTGTAGCCAAAGCTAGAGAAGCCCTCCCGGGCTCTGTTCACATCCCCTGATGCTTTTCCCTGCAAGTTGTCTCCCGTCTGCCCCAGGAAGACTCTCTGTATAACCTAACCTGTCACTTCCCAGTTCTCTGTTCCGGGGAGTCGCAGACCTTGGCTGAGTAAATGGAAGGTGGTTCTTAGCAATGAACAGGCACCTACATTACTCAACTCGCAAGTATTTTACCATTTTGCCATTTTCTCTTCTGAGCTTTGCAACAGCTCTGTGAGGATGGGGCCGGGCAGGAGGGGCCAGGCTATCCCTGTCTTGCAGATAAGAAAATTGAGGCTTGGAGAGAATAAGAATGTGCCCAAGATGACACCATCAGAGGGTCAGAATTGAGGTGCAAACCCAGTTATTTGAGGGCAAATCCAGGCCTCTGTCCTTGGATCCCCCAGAGTAGGCTGGGCCTGCTTCTCTCTTACTTCTACGTTTTTAATAGACATGATTTCTTCAAAGTGCCATTTTATCTCCATAGGTACCTCCAGACACCACCCAGGCTGCAGCAAATGGAATGGGAGAGGCTAACACACCATAATTTTTCAATTCCATGATGCCCATTTTTTCTCACATTTTAACGTCTCTAAAATTGGGGCACATCTTATGATTGATGGCATCTTACAATTACACTTGGCAGTACTTTTTCTTGGTGATACAAAAAAACAACAGTGTATCTTACAACTGATAGCTTAGATTCAGTGAAATCCTAGAATACAACAGGTTTGAAAATTC
进一步的,所述LncRNA-RP5竞争性抑制miR-34a-5p调控人胎盘钙黏蛋白介导的内化作用从而促进小细胞肺癌侵袭转移。
本发明获得了如下有益效果。
本申请的抑制LncRNA-RP5表达的试剂可以抑制LncRNA-RP5表达,可以有效改善小细胞肺癌患者的预后,抑制小细胞肺癌的迁移和增殖,促进小细胞肺癌细胞的凋亡,具有极大的临床意义。
附图说明
图1是本发明影响小细胞肺癌患者预后的LncRNA差异表达结果图;
图2是本发明LncRNA-RP5在小细胞肺癌肿瘤组织和癌旁组织的表达差异图;
图3是本发明LncRNA-RP5能够促进小细胞肺癌细胞的增殖和迁移实验结果图;
图4是本发明LncRNA-RP5能够抑制小细胞肺癌细胞的凋亡实验结果图;
图5是本发明裸鼠成瘤实验结果图。
具体实施方式
以下参照实施例对本发明进行进一步的技术说明。
(1)小细胞肺癌患者LncRNA-RP5的表达与预后的关系
从2000余例小细胞肺癌患者中筛选出生存期完整、病理成分单一、治疗规范的局限期小细胞肺癌患者107例。考虑到手术患者肿瘤负荷为零,其发生发展更能反映出肿瘤的生物学特征,因此,从中挑选了5对生存期差异显著(生存期小于12个月5例,生存期大于36个月5例)、基线水平一致的手术患者,应用其蜡块组织检测差异表达的LncRNA,应用能够检测已知和未知基因的RNA-seq方法,而非传统的用于检测已知基因的基因芯片。检测发现了30余种差异表达的LncRNA。其中,LncRNA-RP5差异显著,且LncRNA-RP5高表达,患者预后差(图1A.LncRNA筛选流程图;图1B.LncRNA差异表达火山图,筛选阈值为 p值< 0.05,差异表达LncRNA共33个。A组为生存期长的小细胞肺癌患者组,C组为生存期短的小细胞肺癌患者组,分析发现LncRNA-RP5在C组高表达,结果显示:LncRNA-RP5高表达,预后差;图1C.LncRNA差异表达热点图)。此外,进一步检测了20对小细胞肺癌的癌和癌旁组织,发现LncRNA-RP5在癌组织中高表达(图2)。
(2)LncRNA-RP5对小细胞肺癌细胞迁移和增殖的影响
1)LncRNA-RP5能够促进小细胞肺癌细胞的增殖和迁移,抑制细胞凋亡(图3、4)
图3A:应用小细胞肺癌细胞株,瞬时过表达LncRNA-RP5,转染48小时后,CCK8检测细胞增殖。
图3B:应用LncRNA-RP5的类似物,作用于小细胞肺癌细胞株,检测miR-34a-5p的表达。结果显示:LncRNA-RP5能够下调miR-34a-5p的表达。
图3C:将高表达LncRNA-RP5的病毒质粒,转染至小细胞肺癌细胞株,Transwell实验检测迁移细胞数。结果显示:LncRNA-RP5能够促进小细胞肺癌细胞迁移。
图4 :LncRNA-RP5能够抑制小细胞肺癌细胞的凋亡
通过病毒转染的方式,使小细胞肺癌细胞系中LncRNA-RP5高表达,在相同实验条件下,与LncRNA-RP5正常表达的小细胞肺癌细胞系进行比较,观察两组细胞的凋亡情况。
2)在裸鼠成瘤实验提示高表达LncRNA-RP5的小细胞肺癌细胞系,其成瘤能力增强(图5)
通过病毒转染的方式,使小细胞肺癌细胞系中LncRNA-RP5高表达,一组用LncRNA-RP5高表达的小细胞肺癌细胞悬液接种于裸鼠;另一组用普通的小细胞肺癌细胞悬液接种于裸鼠。在同样的实验条件下,比较两组细胞的成瘤能力。
本具体实施方式的实施例均为本发明的较佳实施例,并非依此限制本发明的保护范围,故:凡依本发明的结构、形状、原理所做的等效变化,均应涵盖于本发明的保护范围之内。
机译: 筛选治疗剂,抑制多核苷酸序列,治疗非甾体类癌症,筛选试剂特异性结合多核苷酸的方法以及确定患者是否处于发展或患有非糖尿病风险的方法类固醇癌,药物组合物,表达和/或含有反义分子的治疗剂,反义分子或细胞,免疫原性膜蛋白,其片段,衍生物或同源物中至少一种或来自含有和/或含有细胞的细胞的用途或表达至少一种免疫原性膜蛋白或其片段,衍生物或同系物以及一种试剂或抗体,试剂和试剂盒,用于鉴定有发生或患有非甾体癌风险的患者
机译: 抑制血管生成的抑制剂,一种制备AGnet的方法,一种修饰该试剂的方法及其在制备治疗肿瘤的药物中的用途
机译: 一种用于抑制血管生成的抑制剂,一种用于制备AGnet的方法,一种用于对该试剂进行修饰的方法及其在制造治疗肿瘤的药物中的用途。