CRISPR/Cas9系统及其在构建α、β和αβ地中海贫血模型猪细胞系中的应用

摘要

本发明公开了CRISPR/Cas9系统及其在构建α、β和α&β地中海贫血模型猪细胞系中的应用，针对猪HBA和HBB基因各设计了一对靶点序列，利用该两对靶点序列构建了三种CRISPR/Cas9系统，每种CRISPR/Cas9系统均包括gRNA载体和Cas9表达载体；将该三种CRISPR/Cas9系统中的表达载体按比例分别转入猪成纤维细胞，筛选得到α、β和α&β地中海贫血模型猪细胞系。本发明通过基因编辑技术在猪原代成纤维细胞中对猪HBA、HBB基因分别造成单基因突变及联合基因突变，得到HBA、HBB、HBA&HBB基因突变细胞。