用于RASSF1A基因甲基化检测的荧光定量PCR检测试剂盒及其应用

摘要

本发明涉及一种用于RASSF1A基因甲基化检测的荧光定量PCR检测试剂盒及其应用，所述试剂盒包括一对甲基化扩增引物和二条甲基化检测探针，所述一对甲基化扩增引物用于扩增RASSF1A基因启动子到第1‑3外显子的序列中一段CpG序列富集区域，该段CpG序列富集区域是一个PCR反应所扩增的序列，该段CpG序列富集区域中具有至少8个甲基化的CpG序列；所述二条探针分别用于检测PCR扩增产物的正链和负链，两条探针都使用相同的荧光报道基团和淬灭基团。在本发明中，充分利用针对RASSF1A基因片段扩增得到的PCR产物双链，每条链都能产生反应信号，因此可以提高检测甲基化片段的灵敏度。