一种抗仔猪腹泻益生菌制剂及其制备方法

摘要

本发明提供了一种抗仔猪腹泻益生菌制剂，其按重量份计，由如下组分组成：枯草芽孢杆菌的冻干菌粉10～15份、地衣芽孢杆菌的冻干菌粉4～6份，艾叶发酵冻干粉1～3份；所述枯草芽孢杆菌的保藏号为CGMCC No.9660，所述枯草芽孢杆菌的冻干菌粉中，活菌含量≥40亿个/g；所述地衣芽孢杆菌的保藏号为CGMCC No.5686，所述地衣芽孢杆菌的冻干菌粉中，活菌含量≥50亿个/g。本发明还提供了制备上述制剂的方法和在制备防止仔猪腹泻方面药物的应用。发明的的抗仔猪腹泻益生菌制剂能显著的降低仔猪腹泻的发生率，具有良好的实际应用和市场前景。

说明书

技术领域

本发明属于防治仔猪腹泻的生物制剂领域，具体涉及一种抗仔猪腹泻益生菌制剂及其制备方法。

背景技术

仔猪因肠道内尚未建立稳定的微生态系统，自身抵抗力较低，对外界刺激敏感，易受各种病原微生物的侵袭和各种应激因素的影响，因此易出现腹泻的病症。造成仔猪腹泻的原因主要有病原微生物、寄生虫、营养因素、仔猪本身特殊的生理机能以及环境应激因素等。

在生产实践中，除了加强仔猪和母猪的饲养管理之外，对于腹泻的防治一般采用抗生素干预，例如恩诺沙星可溶性粉加水拌料给仔猪饮用。在不采用抗生素的防治方法中，比较典型的是利用中草药防治，如采用含有白头翁、黄连、黄柏、秦皮等中药成分的制剂进行喂饲，可起到清热凉血、燥湿止痢、修复肠胃黏膜、提高仔猪群的免疫力等功效。

另外，随着生物技术的发展，采用微生物制剂调节胃肠道菌群平衡，越来越受到人们的关注。然而，目前针对仔猪腹泻的微生物制剂仍比较少，且效果也并不突出。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种抗仔猪腹泻益生菌制剂及其制备方法。本发明的抗仔猪腹泻益生菌制剂可适用于多种仔猪饲料，能使得腹泻发生率低于2％。

为了实现上述目的，本发明提供的技术方案如下：

一种抗仔猪腹泻益生菌制剂，所述抗仔猪腹泻益生菌制剂，按重量份计，由如下组分组成：

枯草芽孢杆菌的冻干菌粉10～15份、地衣芽孢杆菌的冻干菌粉4～6份，艾叶发酵冻干粉1～3份；

所述枯草芽孢杆菌的保藏号为CGMCC No.9660，所述枯草芽孢杆菌的冻干菌粉中，活菌含量≥40亿个/g；所述地衣芽孢杆菌的保藏号为CGMCC No.5686，所述地衣芽孢杆菌的冻干菌粉中，活菌含量≥50亿个/g；

所述艾叶发酵冻干粉由如下制备方法获得：

将磨碎之后的艾叶粉末和煮烂之后的土豆，按照重量比3:1进行混合，加入无菌水使得固液重量比为2.5:1，以接种量为2％，接种黑曲霉Aspergillus niger YM33182进行发酵，发酵时，于28～32℃下进行发酵36小时；对发酵所得物沥干水后，进行冷冻干燥，即得山楂发酵干燥粉；所述黑曲霉Aspergillus niger YM33182保藏号为：CCTCC No:M206H3。

作为本发明的一个优选技术方案，所述抗仔猪腹泻益生菌制剂，按重量份计，由如下组分组成：枯草芽孢杆菌的冻干菌粉12份、地衣芽孢杆菌的冻干菌粉5份，艾叶发酵冻干粉2份。

作为本发明的一个优选技术方案，在接种黑曲霉Aspergillus niger YM33182时，按体积百分数，接种量为2％。

作为本发明的一个优选技术方案，在制备艾叶发酵干燥粉时，进行发酵时，于28～32℃下进行发酵36小时；对发酵所得物沥干水后，进行冷冻干燥，即得。

本发明还提供了制备上述抗仔猪腹泻益生菌制剂的方法：将所述枯草芽孢杆菌的冻干菌粉、地衣芽孢杆菌的冻干菌粉和艾叶发酵冻干粉混合，即得。

本发明还提供了上述抗仔猪腹泻益生菌制剂在用于制备治疗仔猪腹泻方面药物的应用。具体应用时，按重量百分比计，将所述抗仔猪腹泻益生菌制剂添加入仔猪饲料中，添加量为0.5～0.8％。

本发明的有益效果：

本发明的的抗仔猪腹泻益生菌制剂能显著的降低仔猪腹泻的发生率，具有良好的实际应用和市场前景。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明进行具体描述，有必要在此指出的是以下实施例只是用于对本发明进行进一步的说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的技术熟练人员根据上述发明内容所做出的一些非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。

本发明中的枯草芽孢杆菌(保藏号为CGMCC No.9660)、地衣芽孢杆菌(保藏号为CGMCC No.5686)和黑曲霉Aspergillus niger YM33182(保藏号为：CCTCC No:M206H3)均为已有菌株，为市场采购而得。

以下实施例中，所述艾叶发酵冻干粉由如下制备方法获得：

将磨碎之后的艾叶粉末和煮烂之后的土豆，按照重量比3:1进行混合，加入无菌水使得固液重量比为2.5:1，以接种量为2％，接种黑曲霉Aspergillus niger YM33182进行发酵，发酵时，于28～32℃下进行发酵36小时；对发酵所得物沥干水后，进行冷冻干燥，即得葡萄籽发酵干燥粉；所述黑曲霉Aspergillus niger YM33182保藏号为：CCTCC No:M206H3。

实施例1

1、实验动物，从江当地饲养场断奶从江香猪仔猪。

2、饲料添加剂：枯草芽孢杆菌(保藏号为CGMCC No.9660)的冻干菌粉(活菌含量≥40亿个/g)、地衣芽孢杆菌(保藏号为CGMCC No.5686)的冻干菌粉(活菌含量≥50亿个/g)、艾叶发酵冻干粉。

3、腹泻发生率因素预试验

基础饲料配方(w/w)：玉米48％、碎米10％、麸皮10％、豆饼10％、鱼粉8％、青料2.5％、碳酸钙0.5％、磷酸钙0.5％、盐0.5％。

以添加量为0.5％(w/w)，向基础饲料中分别添加枯草芽孢杆菌(保藏号为CGMCCNo.9660)的冻干菌粉(活菌含量≥40亿个/g)、地衣芽孢杆菌(保藏号为CGMCC No.5686)的冻干菌粉(活菌含量≥50亿个/g)和艾叶发酵冻干粉，分别记为实验组1、实验组2和实验组3.

取实验动物从江香猪仔猪80头，该批仔猪断奶日为出生并喂饲母乳的第12～14天，将该批仔猪分为4组，每组20头，分别喂饲基础饲料(作为对照组)、实验组1的饲料、实验组2的饲料和实验组3的饲料。喂饲时间为50日，每日喂饲两次，自由饮水，考察腹泻发生率情况，结果如表1所示。从表1可知，单独添加枯草芽孢杆菌(保藏号为CGMCC No.9660)冻干菌粉、地衣芽孢杆菌(保藏号为CGMCC No.5686)冻干菌粉或艾叶发酵冻干粉，均不能有效的降低腹泻发生率。

表1

4、预优化实验

对枯草芽孢杆菌(保藏号为CGMCC No.9660)冻干菌粉、地衣芽孢杆菌(保藏号为CGMCC No.5686)冻干菌粉和艾叶发酵冻干粉进行不同的组合方式，以组合获得饲料添加剂，并按照添加量0.5％(w/w)，向基础饲料中添加饲料添加剂，考察混合物对于仔猪腹泻发生率的影响，每个实验组的实验动物均为20头，参照腹泻发生率因素预试验的饲养方法进行饲养。组别的设置和实验结果如表2所示，表2

5、优化实验

根据预优化实验，我们能够看出，枯草芽孢杆菌(保藏号为CGMCC No.9660)、地衣芽孢杆菌(保藏号为CGMCC No.5686)和艾叶发酵冻干粉的混合，对于仔猪腹泻发生率有着明显影响。经过大量摸索实验后，我们发现，采用如下配方做成饲料添加剂，加入到基础饲料中(添加量为0.5％(w/w))，在实验动物为断奶从江香猪仔猪数量为100头时，腹泻发生数目仅为1头，即腹泻发生率1％。

饲料添加量配方：

按重量份计，枯草芽孢杆菌的冻干菌粉12份、地衣芽孢杆菌的冻干菌粉5份，艾叶发酵冻干粉2份。

6、饲料适用性实验

在上述优化实验的基础上，我们对优化实验筛选出的饲料添加剂对于不同饲料的适用性进行实验，实验采用的饲料配方如下：

饲料1的配方为：60w/w％米糠、30w/w％玉米粉和10w/w％当季蔬菜；饲料2的配方为：玉米74.86％、麦麸5.5％、豆粕17.5％、石粉0.8％、磷酸氢钙0.5％、食盐0.3％、小苏打0.15％、赖氨酸盐酸盐0.04％、胆碱0.08、甜味剂0.03％、复方维生素(按重量比4:2:1:2:3:3，由维生素E、维生素B2、维生素K、叶酸、泛酸和烟酸组成)0.24％；饲料3的配方为：玉米65％、次粉1.8％、发酵豆粕12.60％、豆粕14.17％、鱼粉2.8％、采油0.28％、石粉0.91％、磷酸氢钙1％、食盐0.32％、氯化胆碱0.06％、香味素0.05％、复合预混素(含锰100ml/kg、锌1332mg/kg、铁2664mg/kg、铜167mg/kg、碘5mg/kg、硒5mg/kg、维生素A 57000IU/kg、维生素D

选取240头断奶从江香猪仔猪作为实验动物，分为6组，每组40头，参照优化实验的方法，进行喂饲，考察腹泻发生率。其中，每种饲料设置一个对照组(不添加饲料添加剂)和一个实验组(按0.5％(w/w)添加饲料添加剂)。实验结果如表3所示，结果显示，本发明的所得的添加剂可以适用于多种饲料，并显著的降低仔猪的腹泻发生率。

表3

实施例2

调整抗仔猪腹泻益生菌制剂(即实施例1所述的饲料添加剂)的配方如下：

枯草芽孢杆菌的冻干菌粉10份、地衣芽孢杆菌的冻干菌粉6份，艾叶发酵冻干粉1份。

选取断奶从江香猪仔猪100头作为实验动物，按照实施例1中的优化实验中的方法进行饲养，结果显示腹泻发生率为2％。

实施例3

调整抗仔猪腹泻益生菌制剂(即实施例1所述的饲料添加剂)的配方如下：

枯草芽孢杆菌的冻干菌粉15份、地衣芽孢杆菌的冻干菌粉4份，艾叶发酵冻干粉3份。

选取断奶从江香猪仔猪100头作为实验动物，按照实施例1中的优化实验中的方法进行饲养，结果显示腹泻发生率为2％。