RGD4C融合抗TNFα纳米抗体蛋白、制备方法及其应用

摘要

本发明涉及生物医药领域，具体公开了一种RGD4C融合抗TNFα纳米抗体的设计，表达及抗肿瘤活性研究。本发明公开了一种RGD4C融合的抗TNFα纳米抗体蛋白，核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示；该RGD4C融合抗TNFα纳米抗体蛋白的构建表达及抗肿瘤研究包括以下内容：设计三种不同构型RGD4C融合的TNFα纳米抗体；酵母表达载体构建；酵母表达系统诱导蛋白表达；目的蛋白进行镊柱纯化；融合蛋白体外抗MDA‑MB‑231肿瘤的增殖、转移作用研究；MDA‑MB‑231荷瘤裸鼠体内进行给药后评价肿瘤增殖、转移及EMT转化作用。研究确定本发明V‑L‑R‑H构型的RGD4C融合抗TNFα纳米抗体，具有体内外抑制MDA‑MB‑231肿瘤细胞增殖、转移的作用，未来可进一步开发应用于乳腺癌的临床治疗中。