一种微滴数字PCR分析抗除草剂转基因大豆J12拷贝数的方法

摘要

本发明公开了一种微滴数字PCR分析抗除草剂转基因大豆J12拷贝数的方法，该方法以抗除草剂转基因大豆J12的G2‑epsps和GAT外源插入目的基因序列、3’端转化体特异性序列设计合成特异性引物和探针，结合大豆内标基因Lectin，构建微滴数字PCR反应体系。微滴数字PCR(droplet digital PCR,dd PCR)是近年来兴起的一种新的绝对定量技术，通过极度稀释实现理论上的单分子扩增，然后用终点法PCR和泊松分布计算出样品的原始浓度，无需标准品，无需构建标准曲线，通过外源基因与内标准基因拷贝数浓度的比值计算样品的拷贝数。微滴数字PCR方法是一种经济、快速和准确的外源基因拷贝数分析新方法，灵敏度和准确性高，将会在拷贝数分析中广泛应用。