一种芍药属植物花粉活力的检测剂及检测方法

摘要

本发明公开了一种芍药属植物花粉活力的检测剂及检测方法，包括以下成分：硼酸、蔗糖、赤霉素、柠檬酸和纯净水，各成分含量为，每100毫升检测剂中含硼酸0.1g、蔗糖30g、赤霉素0.02g、柠檬酸0.01g，其余为纯净水，本发明通过观察花粉在检测剂中的萌发情况来判断花粉的活力，具有操作简便、安全快速、省时省财、结果准确的优点，适宜于稀缺花粉的活力检测。

说明书

技术领域

本发明属于植物育种技术领域，具体涉及一种芍药属植物花粉活力的检测剂及检测方法。

背景技术

牡丹、芍药均是芍药科、芍药属的名贵花卉。它们是集观赏、药用、茶用、油用、食用等用途于一身的经济作物，在国内外都备受关注，近年来随着牡丹、芍药产业化的发展，其品种改良和推陈出新显得越来越重要，人工定向杂交育种是目前培育芍药属植物新品种最常用也最有效的方法。在定向培育牡丹、芍药新品种的过程中，许多的优良组合（尤其是牡丹、芍药组间、亚组间以及种间的远缘杂交），由于杂交父、母本花期不遇而导致无法及时进行，需要等待较长的时间，甚至需要将花粉储存起来待来年使用。花粉在等待中会因为自身的寿命或存放条件限制而逐渐死亡；还有些品种的花粉本身就没有活力或活力很低，使用此类花粉必导致杂交失败。因此，在人工授粉前需要进行花粉的活力检测，以减少无用功。

发明内容

本发明为了解决上述技术问题，提供一种芍药属植物花粉活力的检测剂及检测方法，通过观察花粉在检测剂中的萌发情况来判断花粉的活力，具有操作简便、安全快速、省时省财、结果准确的优点，适宜于稀缺花粉的活力检测。

本发明所采用的技术方案是：一种芍药属植物花粉活力的检测剂，包括以下成分：硼酸、蔗糖、赤霉素、柠檬酸和纯净水，各成分含量为，每100毫升检测剂中含硼酸0.1g、蔗糖30g、赤霉素0.02g、柠檬酸0.01g，其余为纯净水。

其中，硼酸具有促进花粉萌发和花粉管伸长以及杀菌消毒的作用，经试验得知，浓度在0.1％-1.5％为最佳，但硼酸具弱酸性，高浓度对生物有一定的毒害，所以选择经济、安全、有效的低浓度硼酸。

赤霉素是生物激素，具有解除植物休眠，促进萌动的效果，但高浓度却能抑制植物生长；根据芍药属植物促成栽培上应用结果，200ppm的赤霉素打破其鳞芽休眠、促进其萌动生长既经济又有效。

蔗糖主要起营养作用，高浓度的蔗糖液具有一定的粘度，附着性好；柠檬酸也起一定的杀菌和营养作用，同时对硼酸具有促进溶解的作用。

因此，选择上述四种成分作为检测剂的组成成分。

所述检测剂的制备方法为包括：

步骤一、利用天平称取30g蔗糖倒入烧杯中；

步骤二、用量筒量取80ml纯净水加入到步骤一所述的烧杯中，用玻璃棒搅拌使之完全溶解，得到蔗糖溶液；

步骤三、利用天平依次量取0.1g硼酸、0.02g赤霉素和0.01g柠檬酸；

步骤四、将称量好的硼酸和柠檬酸直接加入步骤二中搅拌溶解；

步骤五、将赤霉素倒入指形管中，用滴管加入1-2毫升75%的医用酒精，使其溶解后加入步骤四的溶液中，用少量纯净水把指形管冲洗两遍，冲洗水也加入步骤四的溶液中；

步骤六、定容；将步骤五的溶液倒入定容瓶中，逐渐加入纯净水至100毫升刻度，摇匀倒入100-200毫升的棕色瓶中，现配现用或放入冰箱中备用。

所述步骤一中，天平的精度为1/100g。

所述步骤三中，天平的精度为1/10000g。

所述步骤六中，冰箱内部温度为1-5℃。

其中，蔗糖主要起营养作用，浓度要求不需要太精确，且用量较大，就用粗天平称量，也容易操作；另外蔗糖多，浓度高，溶解需要一定的时间，而硼酸、柠檬酸用量少，用精天平才能称量准确，称量完成，蔗糖也溶解好了，直接倒入蔗糖液中即可，因此，将蔗糖与硼酸、柠檬酸分别进行称量和溶解，有利于节省时间；赤霉素是需要酒精溶解的，需要单独进行，且常温放置，赤霉素易分解失效，故最后加入溶液内，避免赤霉素的分解。

其中，将溶液导入棕色瓶中，是避免检测剂见光分解失效，棕色瓶色暗，可以提高检测剂的稳定性，对检测剂进行保护。

所述检测剂的使用方法包括以下步骤：

步骤一、将需要检测的花粉取出备用；

步骤二、用滴管吸取适量的检测剂滴进干净的凹型载玻片的凹陷处；

步骤三、用探针或棉签蘸取少量的备用花粉均匀的撒在检测剂表面，并标记好花粉品种名称；

步骤四、将载玻片放入垫有湿润吸水纸的培养皿中，盖上盖子；

步骤五、将培养皿放入培养箱中或盛有40℃左右温水的托盘中2个小时以上；

步骤六、将撒有花粉的载玻片拿出，分别放入10倍显微镜下观察花粉管萌发情况，萌发率80％以上的活力为强，30-80％活力一般，30％以下活力差或无；

步骤七、根据检测结果选择使用花粉，进行杂交育种。

所述步骤五中，培养箱内的温度为38-40℃，38-40℃的恒温箱可以更好更安全的进行培养，适度的温水也能够起到同样的效果，有利于提高培养的质量。

所述步骤五中，托盘中温水的深度为1cm以下。

所述步骤五中，托盘上设置遮挡物用以遮挡光线。

本发明的有益效果为：通过观察花粉在检测剂中的萌发情况来判断花粉的活力，具有操作简便、安全快速、省时省财、结果准确的优点，适宜于稀缺花粉的活力检测。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

一种芍药属植物花粉活力的检测剂，包括以下成分：硼酸、蔗糖、赤霉素、柠檬酸和纯净水，各成分含量为，每100毫升检测剂中含硼酸0.1g、蔗糖30g、赤霉素0.02g、柠檬酸0.01g，其余为纯净水。

所述检测剂的制备方法为包括：

步骤一、用精确度为1/100g的天平称取30g蔗糖倒入烧杯中；

步骤二、用量筒量取80ml纯净水 加入到步骤一所述的烧杯中，用玻璃棒搅拌使之完全溶解，得到蔗糖溶液；

步骤三、用精确度为1/10000g的天平依次量取0.1g硼酸、0.02g赤霉素和0.01g柠檬酸；

步骤四、将称量好的硼酸和柠檬酸直接加入步骤二中搅拌溶解；

步骤五、将赤霉素倒入指形管中，用滴管加入1-2毫升75%的医用酒精，使其溶解（赤霉素需要酒精溶解）后加入步骤四中，用少量纯净水把指形管冲洗两遍，冲洗水也加入步骤四中；

步骤六、定容；将步骤五的溶液倒入定容瓶中，逐渐加入纯净水至100毫升刻度，摇匀倒入100-200毫升的棕色瓶中，现配现用或放置1-5℃冰箱中备用。

所述检测剂的使用方法包括以下步骤：

步骤一、将需要检测的花粉取出备用；

步骤二、用滴管吸取适量的检测剂滴进干净的凹型载玻片的凹陷处；

步骤三、用探针或棉签蘸取少量的备用花粉均匀的撒在检测剂表面（注意：一签一粉一剂，不可交叉使用或混用），并标记好花粉品种名称；

步骤四、将载玻片放入垫有湿润吸水纸的培养皿中，盖上盖子；

步骤五、将培养皿放入38-40℃的培养箱中或盛有少量（1㎝以下深度）40℃左右温水的托盘中（上覆报纸等物遮挡光线）2个小时以上；

步骤六、将撒有花粉的载玻片拿出，分别放入10倍显微镜下观察花粉管萌发情况，萌发率80％以上的活力为强，30-80％活力一般，30％以下活力差或无；

步骤七、根据检测结果选择使用花粉，进行杂交育种。