用于立体选择性制备手性2-(杂)芳烷基硫基嘧啶类的方法和可由其获得的产物

摘要

提供了一种用于制备式I化合物的方法，其中R1和R2各自具有本说明书中提供的含义。还提供了一种用于制备药物活性化合物的方法，其包含用于制备式(I)化合物的方法。

说明书

技术领域

本发明涉及用于获得具有高手性纯度的化合物的新颖合成方法。具体来说，其涉及用于产生手性嘧啶的方法和其在制备药物活性化合物时作为中间体的用途。

背景技术

本说明书中对显然先前公开的文献的列举或论述不必应视为承认所述文献是目前先进技术的一部分或是公共常识。

已知7-氨基-5-硫代-噻唑并[4,5-d]嘧啶是趋化因子受体的拮抗剂(

分子顶部处的立体中心可以通过使用亮氨醇的所需对映异构体(其衍生于氨基酸亮氨酸，并且可以极高对映异构体纯度获得)来设定。然而，提供可扩展的途径以在第二立体中心(用*标记)提供足够的手性纯度已证实是一项重大挑战。

在已公开的实验室规模途径(

6-氨基-2-{[(1S)-1-苯基乙基]硫基}嘧啶-4-醇的基本途径公开于WO 2006/107258中。

然而，已知方法的按比例增加可能产生较低手性纯度的物质。尽管可能通过例如连续的重结晶步骤来制备更纯的物质(达到一定的限度)，但此类纯化步骤将大大降低制程的产率并且在化学生产制程中也是高度不合期望的。

发明内容

我们现在出人意料地发现，如6-氨基-2-{[(1S)-1-苯基乙基]硫基}嘧啶-4-醇的(杂)芳基烷基硫基嘧啶可通过在仔细选择的反应条件下制备对应的(杂)芳基烷基磺酸酯和此物质与所需的嘧啶硫醇根阴离子的后续反应而以良好产率且以极佳手性纯度获得，而无需额外重结晶步骤。

此方法为合成中间体提供一种简单且可扩展的途径，其允许产生药学上引起关注的化合物，如具有极高手性纯度的(2R)-2-[(2-氨基-5-{[(1S)-1-苯基乙基]硫代}[1,3]噻唑并[4,5-d]嘧啶-7-基]氨基]-4-甲基戊-1-醇。

在本发明的第一方面，提供一种用于制备式I化合物

或其盐的方法，其中

R

R

R

R

所述方法包含以下步骤：

(i)形成式II化合物

其中R

此举通过在合适的碱B

其中R

在所述溶剂中，

在B

并且随后

(ii)使所述式II化合物与式IV化合物反应，

其中M

其中所述式III化合物以单一对映异构体形式提供，

所述方法在本文中可称为“本发明方法”。

除非另外指示，否则本文所使用的全部技术与科学术语将具有本发明所涉及的领域的普通技术人员所理解的共同含义。

通过本文所描述的方法产生的化合物(即如本文所定义的式I化合物、式Ia化合物和其它化合物)的盐包括酸加成盐和碱加成盐。此类盐可以通过常规方式来形成，例如通过使游离碱形式的本发明化合物与一个或多个当量的适当酸，任选地在溶剂中或所述盐不溶性的介质中反应，之后使用标准技术(例如在真空中，通过冷冻干燥或通过过滤)去除所述溶剂或所述介质来形成。还可以使用本领域技术人员已知的技术来制备盐，如通过例如使用适合的离子交换树脂将呈盐形式的本发明化合物的抗衡离子与另一种抗衡离子交换来制备。

可提及的具体酸加成盐包括通过与相应酸反应，从而使本发明化合物质子化，以形成羧酸盐而形成的那些盐(例如，甲酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、丙酸盐、异丁酸盐、庚酸盐、癸酸盐(decanoate)、癸酸盐(caprate)、辛酸盐、硬脂酸盐、丙烯酸盐、己酸盐、丙炔酸盐、抗坏血酸盐、柠檬酸盐、葡萄糖醛酸盐、谷氨酸盐、羟乙酸盐、α-羟基丁酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、苯乙酸盐、扁桃酸盐、苯基丙酸盐、苯基丁酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、邻乙酰氧基-苯甲酸盐、水杨酸盐、烟酸盐、异烟酸盐、肉桂酸盐、草酸盐、丙二酸盐、丁二酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、羟基马来酸盐、马尿酸盐、邻苯二甲酸盐或对苯二甲酸盐)、卤化氢盐(例如，盐酸盐、氢溴酸盐或氢碘酸盐)、磺酸盐(例如，苯磺酸盐，甲基-苯磺酸盐、溴-苯磺酸盐或氯-苯磺酸盐，二甲苯磺酸盐，甲磺酸盐，乙磺酸盐，丙磺酸盐，羟基-乙磺酸盐，1-萘-磺酸盐或2-萘-磺酸盐或1,5-萘-二磺酸盐)或硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、单氢磷酸盐、二氢磷酸盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐或硝酸盐等。

可提及的具体碱加成盐包括通过与相应碱反应，因此从本发明化合物中去除质子，以与碱金属(如Na盐和K盐)、碱土金属(如Mg盐和Ca盐)、有机碱(如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、缓血酸胺和赖氨酸)以及无机碱(如氢氧化氨和氢氧化铝)形成盐而形成的盐。更具体地说来，可提及的碱加成盐包括Mg盐、Ca盐，以及最具体地说来，包括K盐和Na盐。

可提及的更具体的盐包括盐酸盐、氢溴酸盐、钠盐、钾盐和锂盐。

除非另外指定，否则本文所定义的C

除非另外指定，否则本文所定义的C

除非另外指定，否则本文所定义的C

为避免疑义，除非另外指定，否则本文中称为“烷基”、“烯基”和/或“炔基”的基团将被视为是指存在于此类基团中的键中的最高不饱和度。例如，具有碳-碳双键并且在同一基团中具有碳-碳三键的此类基团将被称为“炔基”。可替代地，可具体指定，此类基团将仅包含指定的不饱和度(即按需要在其中的一个或多个键中；例如，在其中的一个键中)。

技术人员将理解，存在于获自本发明方法的式I化合物中的取代基将取决于所反应的式II化合物中存在的取代基，并且将能够相应地选择适当起始物质。

式I、式II和式III化合物含有不对称碳原子(*)并且因此以两种对映异构体形式存在。

此手性中心的立体化学可以根据使用楔形键(wedged bond)或切割键(hashedbond)指示朝向纸张平面(plane of the paper)之外或之内的基团的惯例来定义。如果使用此类键，那么可以理解为指示式I化合物的特定单一对映异构体。

如本文所描述，本发明方法产生具有高手性纯度的式I化合物(即单一对映异构体)。因此，如果手性中心的立体化学并未定义(即附接到手性中心的所有基团通过平键连接到所述手性中心)，除非另外规定，否则可以理解为指示任一对映异构体可以纯形式存在。

除非另外规定，否则本文中对单一对映异构体(和类似于对以纯形式存在的对映异构体等)的提及可理解为指示至少约90％(即至少约80％的对映异构体过量(e.e))，如至少约95％，例如至少约97％(例如至少约99％(约98％e.e.))的对映异构体纯度。更具体地说来，单一对映异构体可以具有至少约99.5％，如至少约99.7％(99.4％e.e.)的对映异构体纯度。

前两个段落类似地适用于含有多于一个手性中心的化合物中的相关手性中心处的差向异构体纯度。

当在本文中关于特定值(如量)使用时，术语“约”(或类似术语，如“大约”)将被理解为指示此类值的变化可能高达所定义值的10％(具体地，高达5％，如高达1％)。可预期，在每种情况下，此类术语可用符号“±10％”等替换(或者通过指示基于相关值计算的特定量的方差)。还可预期，在每种情况下，可删除此类术语。

在具体实施例中，式II化合物在其用于步骤(ii)之前不从来自步骤(i)的反应混合物中分离。

技术人员将理解，对未从反应混合物中分离的化合物(如在用于步骤(ii)之前不从来自步骤(i)的反应混合物中分离的式II化合物)的提及指示在其用于下一反应步骤之前不进行获得呈纯形式的相关化合物的尝试。然而，适当时，可进行某些纯化步骤和/或其它操作，如水性处理(aqueous work up)、浓缩或稀释反应混合物和/或过滤反应混合物以去除不溶性副产物。具体来说，所述短语可以理解为指示相关化合物(例如式II化合物)以用于先前合成步骤的反应溶剂中的溶液形式引入到下一反应步骤中。

本发明方法的步骤(ii)在手性中心处的立体化学反转的情况下发生。技术人员将理解，这意指当与起始物质(即式II(或III)化合物)相比时，手性中心的相对立体化学在产物(即式I化合物)中是反转的。由于根据用于分配绝对立体化学的卡恩-英格尔-普雷洛格规则(Cahn-Ingold-Prelog convention)的取代基的优先级在步骤(ii)期间并未变化，所以式I化合物的绝对立体化学也将与式II(或III)化合物的绝对立体化学相反。

不希望受理论所束缚，据信步骤(ii)经由双分子亲核取代(S

在具体实施例中，本发明方法的步骤(i)在溶剂(S

例如，如果使用甲磺酰氯(mesyl chloride)(甲磺酰基氯)作为磺化(或确切地说，甲磺酰化)剂和三乙胺作为碱(B

如本文所用，术语不溶性的可以理解为意指所指定的化学物质(例如盐、离子或中性化合物)在室温下基本上不溶解于相关溶剂中。例如，小于约10％的物质总量呈溶液形式，如小于约5％(例如小于约2％)。

如本文所用，术语离去基团可理解为意指在反应发生之前存在于相关磺化剂上的基团由连接到式II化合物氧原子的键替换。

不希望受理论所束缚，据信选择形成于B

在本发明方法的具体实施例中，步骤(ii)包含使式II化合物在溶剂S

如本文所用，对使溶液相缔合的提及可以理解为指示溶液在同一反应容器中混合在一起。这种混合可涉及将所述溶液中的一种添加到另一种，且所述添加可在短时间段内(例如，可将一种溶液倒入另一种中)，或可控制所述添加以在较长时间段内发生(例如，可将一种溶液逐滴添加到另一种中)。

对逐滴添加的提及可以理解为意指在延长时间段内逐步控制添加溶液或液体试剂。对于给定的实验设置和反应条件集合，技术人员将能够确定合适的添加速率。

在具体实施例中，所述方法还包含以下步骤：

(iii)通过在合适溶剂S

与合适的碱B

在这种情况下，式IV化合物在其用于步骤(ii)之前可不从步骤(iii)的反应混合物中分离。在此类实施例中，式IV化合物的溶液是任选地在一个或多个纯化步骤之后从步骤(iii)获得。

在更具体的实施例中，将式II化合物在S

在本发明的具体实施例中，步骤(i)和(iii)同时进行(即所述反应并行地运行)。

在具体实施例中，步骤(ii)在约室温下进行。如本文所用，‘室温’可理解为指示房间的环境温度，其将一般为约15℃到约25℃，例如约20℃到约25℃(例如约25℃)。

如上文所描述，S

用于S

在具体实施例中，B

在具体实施例中，步骤(i)在约-10℃与约20℃之间，如约-5℃与约10℃之间(例如大约0℃)的温度下进行。步骤(i)可以在使用冰浴冷却的情况下进行。在此类情况下，应理解，将反应混合物冷却到大约0℃±约5℃。

在具体实施例中，S

B

在具体实施例中，步骤(iii)在约40℃到约80℃，如约50℃到约75℃，例如约55℃到约70℃(例如约65℃)的温度下进行。

在具体实施例中，R

在具体实施例中，R

在具体实施例中，R

在具体实施例中，R

在具体实施例中，R

如本文所用，磺化剂可以理解为指示与式III化合物反应时形成磺酸酯(RSO

合适的磺化剂包括磺酸酐，并且具体说来是磺酰卤(例如磺酰氯)。可提及的具体磺化剂包括甲烷磺酸酐(甲磺酸酐)、甲烷磺酰氯(甲磺酰氯)、三氟甲烷磺酰氯(三氟甲磺酰氯)、三氟甲基磺酸酐(三氟甲磺酸酐)、2,2,2-三氟乙烷磺酰氯(三氟乙磺酰氯)、全氟-1-丁磺酰氟、全氟-1-丁烷磺酰氯、对-甲苯磺酰氯(甲苯磺酰氯)、对-甲苯磺酸酐(甲苯磺酸酐)、对-硝基苯磺酰氯(硝基苯磺酰氯)和4-溴苯磺酰氯(溴苯磺酰氯)。可提及的更具体磺化剂包括甲烷磺酸酐(甲磺酸酐)、甲烷磺酰氯(甲磺酰氯)、对-甲苯磺酰氯(甲苯磺酰氯)和对-甲苯磺酸酐(甲苯磺酸酐)。在具体实施例中，磺化剂是甲烷磺酰氯(甲磺酰氯)。

在某些实施例中，本发明方法包含可以按需要在步骤(i)到(iii)之间、期间或之后进行的额外方法步骤。

在具体实施例中，所述方法还包含以下步骤：

(ib)从获自步骤(i)的S

技术人员将理解，一旦步骤(i)的反应完成并且在步骤(ii)的开始之前进行步骤(ib)。

不希望受理论所束缚，据信步骤(ib)会赋予防止由磺化剂(例如氯化物)的离去基团形成的阴离子在步骤(ii)期间参与竞争性亲核取代过程(例如形成式II化合物的对应氯甲苯)的益处，所述过程可导致式I化合物的外消旋化(通过立体化学的反复反转)。

在更具体的实施例中，所述方法还包含以下步骤：

(ic)在步骤(ii)之前，减小式II化合物在S

技术人员将理解，对减小溶液的体积的提及是指通过去除一部分溶剂来浓缩溶液。这可以通过如蒸馏或具体来说是旋转蒸发的标准实验室技术来实现。

以此方式减小溶液的体积具有确保式IV化合物在步骤(ii)期间保持于溶液中的优势。如果过高比例的S

减小式II化合物在S

在完成步骤(ii)之后，使用标准实验室实践获得粗产物，如通过旋转蒸发(或根据需要蒸馏)、水性处理和/或使副产物(如未反应的巯基嘧啶物种)沉淀/过滤来去除溶剂(例如S

在具体实施例中，所述方法包含以下步骤中的一个或多个：

(iib)通过旋转蒸发来浓缩反应混合物；

(iic)将步骤(iib)之后获得的残余物溶解于合适的溶剂(S

(iid)将从步骤(iic)中获得的沉淀物溶解于水或水溶液(例如碱性溶液(例如饱和的Na

(iie)通过旋转蒸发来浓缩合并的有机层；并且

(iif)必要时，通过在减压下蒸馏去除残余溶剂以获得粗产物。

在某些实施例中，S

在具体实施例中，本发明方法还包含以下步骤：

(iiib)用合适的还原剂处理步骤(iii)的反应混合物，以还原反应混合物中形成的任何二硫化物(VI)。

用于步骤(iiib)的合适还原剂包括NaBH

在本发明方法中包括步骤(iiib)将二硫化物转化回硫醇/硫醇盐，所述硫醇/硫醇盐接着能够在步骤(ii)中反应。

在具体实施例中，步骤(iiib)在大约室温下进行。在此类实施例中，在将还原剂添加到反应中之前，使来自步骤(iii)的反应混合物冷却到室温。

在具体实施例中，本发明方法还包含以下步骤

(iv)用合适的溶剂S

如技术人员将了解的，步骤(iv)还可以被描述为通过用合适的溶剂(S

技术人员将理解的是，对粗物质的提及是指在已对反应混合物进行标准有机化学操作(如步骤(iib)到(iif)中所描述的那些)以便例如去除溶剂和/或水溶性副产物以获得适合于进一步纯化的物质之后获得的物质。具体说来，粗物质可以理解为是在去除反应溶剂和任何适于通过沉淀/过滤和/或水性处理而去除的副产物之后获得的物质。

在具体实施例中，S

在本发明方法中包括步骤(iv)还可提高产物的对映异构体纯度，因为与粗产物相比，所述沉淀物似乎富含主要对映异构体。

在可提及的具体实施例中，所述方法包含以下步骤组合，这些步骤如本文所定义：

I.步骤(i)(磺化)和(iii)(生成硫醇根阴离子)，其同时进行；接着

II.步骤(ib)(过滤以去除在步骤(i)期间形成的不溶性盐)和，任选地步骤(ic)(减少式II化合物在S

III.任选地步骤(iiib)(还原二硫化物)；

IV.步骤(ii)(亲核性取代以产生式I化合物)，包含将步骤(ib)(或(如果包括的话)步骤(ic))之后获得的溶液逐滴添加到步骤(iii)(或(如果包括的话)步骤iiib)之后获得的溶液中

V.步骤(iv)(使式I化合物沉淀)。

如上文所描述，取决于起始物质(式II化合物以及最终由其衍生的式III化合物)的对映异构体纯度，本发明方法生成式I化合物的单一对映异构体。

因此，所述方法用于产生式Ia或式Ib化合物或其盐，

其中R

因为立体化学的反转发生在步骤(ii)期间，技术人员将理解的是，式Ia化合物是经由式IIa化合物的反应而产生的，并且式Ib化合物是经由式IIb化合物的反应而产生的，

其中R

在所述方法的步骤(i)中由相应的式IIIa和式IIIb化合物产生化合物IIa和IIb

其中R

在具体实施例中，所述方法用于产生式Ia化合物。

在具体实施例中，式I化合物(即式Ia或式Ib化合物(例如式Ia化合物))具有大于96％、优选地大于99％、更优选地大于99.5％(例如99.7％)的手性纯度。

在可提及的更具体的实施例中，所述方法用于产生6-氨基-2-{[(1S)-1-苯基乙基]硫基}嘧啶-4-醇或其盐。

根据本发明方法，可以产生手性纯度大于96％、优选地大于99％、更优选地大于99.5％(例如99.7％)的6-氨基-2-{[(1S)-1-苯基乙基]硫基}嘧啶-4-醇或其盐。

根据本发明方法产生的化合物(即式I、式Ia或式Ib化合物(尤其是式Ia化合物))可用作产生药物活性分子时的合成中间体。

因此，在本发明的第二方面，提供了一种用于制备式VII化合物或其盐的方法，

其中R

其中所述方法包含如上文所定义的本发明方法(即一种包含步骤(i)到(iii)(任选地包括本文所描述的额外方法步骤中的一种或多种)，以及任选地如上文所定义的步骤(iv)的方法)。

在本发明第二方面的具体实施例中，所述方法还包含以下步骤：

(v)式VIII化合物或其盐的制备是通过在溴、合适的碱(例如2,6-二甲基吡啶或尤其是吡啶)和合适的溶剂(例如极性非质子溶剂(如上文所提及的那些)，尤其是N,N-二甲基甲酰胺)的存在下使如上文所定义的式I化合物与合适的硫氰酸盐(例如LiSCN、NaSCN或尤其是KSCN)反应，

其中R

(vi)式IX化合物或其盐的制备是通过在约80℃到约150℃(如约100℃到约140℃，例如约110℃到约130℃(例如约120℃))的温度下在合适的碱(例如，LiOH、KOH、CsOH或尤其是NaOH)和合适的溶剂(例如，极性非质子溶剂(如上文所提及的那些)，尤其是N,N-二甲基甲酰胺))的存在下使式VIII化合物反应，

其中R

(vii)式X化合物或其盐的制备是通过在约40℃到约80℃(如约50℃到约75℃，例如约60℃到约70℃(例如约65℃))的温度下在合适的氯化剂(例如SOCl

其中R

(viii)如上文所定义的VII化合物的制备是通过

在约80℃到约150℃(如约100℃到约140℃，例如约110℃到约130℃(例如约120℃))的温度下在合适的碱(例如三乙胺或尤其是N,N-二异丙基乙胺)和合适的溶剂(例如极性非质子溶剂(如上文所描述的那些)，尤其是N-甲基-2-吡咯烷酮))的存在下使式X化合物与亮氨醇反应。

在可提及的其它实施例中，所述方法还包含通过在合适溶剂(例如甲基乙基酮)的存在下用HCl处理式VII化合物来形成式VII化合物的HCl盐(例如单HCl盐)。

在具体实施例中，式VII化合物是单一立体异构体。

本文中对以单一立体异构体形式产生的化合物的提及可理解为指示所述化合物作为单一非对映异构体(例如在化合物VII的情况下为(R,S)-非对映异构体)和所述非对映异构体的单一对映异构体产生。

除非另外规定，否则本文中对单一立体异构体(和类似于对以纯形式存在的立体异构体等)的提及可以理解为指示至少约90％、如至少约95％、例如至少约97％的手性纯度。更具体来说，单一立体异构体可以具有至少约99.5％、如至少约99.7％的手性纯度。

如本文所用，手性纯度可以理解为指示化合物的相关批次中单一立体异构体(即非对映异构体和/或对映异构体)的量(％w/w)。

在具体实施例中，式VII化合物是2-[(2-氨基-5-[(1-苯基乙基)硫代][1,3]噻唑并[4,5-d]嘧啶-7-基)氨基]-4-甲基戊-1-醇或其盐

在更具体的实施例中，式VII化合物是(2R)-2-[(2-氨基-5-{[(1S)-1-苯基乙基]硫代}[1,3]噻唑并[4,5-d]嘧啶-7-基)氨基]-4-甲基戊-1-醇或其盐。

技术人员将理解，标记为‘1’的手性中心的立体化学可以通过选择亮氨醇的任一对映异构体来控制(d-亮氨醇用于在此中心提供所需的(R)-立体化学)。如上文所描述，标记为2的手性中心的立体化学取决于用作步骤(i)的起始物质(式III化合物)的手性苯甲醇的立体化学。本发明方法提供在此立体中心实现更高手性纯度的可扩展途径。

在本发明第二方面的具体实施例中，(2R)-2-[(2-氨基-5-{[(1S)-1-苯基乙基]硫代}[1,3]噻唑并[4,5-d]嘧啶-7-基)氨基]-4-甲基戊-1-醇具有大于99.2％、优选地大于99.5％(例如99.7％)的手性纯度。

本文所公开的方法向具有比可使用先前所公开的方法获得的那些更高的手性纯度的化合物提供可扩展途径。

因此，在本发明的第三方面，提供了化合物6-氨基-2-{[(1S)-1-苯基乙基]硫基}嘧啶-4-醇或其盐，

其中所述化合物具有大于99.1％、优选地大于99.5％的手性纯度。

在本发明的第四方面，提供了化合物(2R)-2-[(2-氨基-5-{[(1S)-1-苯基乙基]硫代}[1,3]噻唑并[4,5-d]嘧啶-7-基)氨基]-4-甲基戊-1-醇或其盐，

其中所述化合物具有大于99.8％的手性纯度。

式VII化合物，尤其是(2R)-2-[(2-氨基-5-{[(1S)-1-苯基乙基]硫代}[1,3]噻唑并[4,5-d]嘧啶-7-基)氨基]-4-甲基戊-1-醇，或其盐可用作药物。因此，可以使用标准程序将这些化合物配制成药学上可接受的配制物。

在本发明的第五方面，提供了一种用于制备药物配制物的方法，所述药物配制物包含(2R)-2-[(2-氨基-5-{[(1S)-1-苯基乙基]硫代}[1,3]噻唑并[4,5-d]嘧啶-7-基)氨基]-4-甲基戊-1-醇或其盐，(或另一种合适的式VII化合物或其盐)，所述方法的特征在于其作为处理步骤包括(尤其是步骤(i)到(iv)，包括如步骤(ib)和(iiib)及其它步骤的额外步骤)。技术人员将知道此类药物配制物将包含活性成分和任选地，一种或多种药学上可接受的赋形剂、佐剂、稀释剂和/或载剂)的混合物或由其组成。

在本发明的第六方面，提供了一种用于制备药物配制物的方法，所述药物配制物包含(2R)-2-[(2-氨基-5-{[(1S)-1-苯基乙基]硫代}[1,3]噻唑并[4,5-d]嘧啶-7-基)氨基]-4-甲基戊-1-醇或其盐，(或另一种合适的式VII化合物或其盐)，所述方法包含将(2R)-2-[(2-氨基-5-{[(1S)-1-苯基乙基]硫代}[1,3]噻唑并[4,5-d]嘧啶-7-基)氨基]-4-甲基戊-1-醇或其盐，(或另一种合适的式VII化合物或其盐)(其可通过如上文所描述的方法来形成)，与(a)一种或多种药学上可接受的赋形剂(例如佐剂、稀释剂和/或载剂)缔合。

与现有技术的方法相比，本文所描述的方法具有更有效且更适合用于大规模合成的优势。具体说来，所述方法具有提供产生具有极佳手性纯度的药物活性化合物的可扩展方法的优势。

与通过其它可扩展合成途径可得到的那些相比，所产生的化合物具有手性纯度更高的优势。

附图说明

图1示出按照实例1中所描述的方法所获得的产物的手性HPLC迹线。

图2示出按照实例2中所描述的方法所获得的产物的手性HPLC迹线。

具体实施方式

DIPEA N,N-二异丙基乙胺

DMF N,N'-二甲基甲酰胺

HPLC 高压液相色谱法

MEK 甲基乙基酮

MTBE 甲基叔丁基醚

NMP N-甲基-2-吡咯烷酮

NMR 核磁共振

MS 质谱法

向250mL圆底烧瓶中装入NaOH薄片(600mg，15.00mmol)、6-氨基-2-硫代-1H-嘧啶-4-酮(埃克药物(Ark Pharm)，95+％，2.37g，15.75mmol)和DMF(30mL)。所述烧瓶装配有冷凝器。将混合物在65℃下搅拌(始于13:25)。在1小时30分钟之后，使混合物冷却至室温(RT)，并添加NaBH

与以上所描述的反应并行地，MTBE中的甲磺酸(R)-1-苯乙基酯如下制备：

向(R)-1-苯基乙醇(埃克药物，98％，1.87g，15.00mmol)和三乙胺(奥德里奇(Aldrich)，99.5％，1.60g，15.75mmol)在MTBE(15mL)中的经搅拌溶液中，在冰浴温度下经14分钟逐滴添加甲磺酰氯(兰卡斯特(Lancaster)，98％，1.84g，15.75mmol)在MTBE(10mL)中的溶液。将所述混合物在冰浴温度下搅拌20分钟。滤出所形成的Et

在冰浴温度下经10分钟将含有甲磺酸盐的MTBE溶液逐滴添加到含有6-氨基-2-硫酮基-1H-嘧啶-4-酮阴离子的DMF溶液中(17:10)。使所述混合物缓慢升温至室温，并在室温下搅拌过夜。在17.5小时之后处理：将所述混合物浓缩至小体积。添加EtOAc(约50mL)，这导致6-氨基-2-硫酮基-1H-嘧啶-4-酮的大量沉淀。通过超声波对所述混合物进行超声波处理，并且接着滤出固体，并用EtOAc(约10mL)洗涤滤饼。将固体悬浮于饱和NaHCO

HPLC纯度：约94％

HPLC手性纯度：99.7％(S)，即99.4％e.e.手性HPLC迹线再现于图1中。

在Astec CHIROBIOTIC T柱(250×4.6mm，5μm)上测量，洗脱剂：100％MeOH，安捷伦(Agilent)1100系统。

向250mL圆底烧瓶中装入NaOH薄片(2.00g，50.00mmol)、6-氨基-2-硫酮基-1H-嘧啶-4-酮(埃克药物，95+％，7.91g，52.50mmol)和DMF(100mL)。所述烧瓶装配有冷凝器。将混合物在65℃下搅拌(始于11:00)。在2小时30分钟之后，使混合物冷却至室温，并添加NaBH

与以上所描述的反应并行地，MTBE中的甲磺酸(R)-1-苯乙基酯如下制备：

向(R)-1-苯基乙醇(埃克药物，98％，6.23g，50.00mmol)和三乙胺(奥德里奇，99.5％，5.34g，52.50mmol)在MTBE(50mL)中的经搅拌溶液中，在冰浴温度下经10分钟逐滴添加甲磺酰氯(兰卡斯特，98％，6.14g，52.50mmol)在MTBE(30mL)中的溶液。将所述混合物在冰浴温度下搅拌20分钟。滤出所形成的Et

在冰浴温度下经20分钟将含有甲磺酸盐的MTBE溶液逐滴添加到含有6-氨基-2-硫酮基-1H-嘧啶-4-酮阴离子的DMF溶液中(15:05)。使所述混合物缓慢升温至室温，并在室温下搅拌过夜。在19小时之后处理：将所述混合物浓缩至小体积，以便去除几乎全部DMF。添加EtOAc(约120mL)，这导致6-氨基-2-硫酮基-1H-嘧啶-4-酮的大量沉淀。通过超声波对所述混合物进行超声波处理，并且接着滤出固体，并用EtOAc(约30mL)洗涤滤饼。将固体悬浮于饱和Na

HPLC纯度：96.5％

HPLC手性纯度：99.8％(S)，即99.6％e.e.(几乎检测不到与R-异构体相对应的峰。由于基线噪声，积分是不确定的)。手性HPLC迹线再现于图2中。

在Astec CHIROBIOTIC T柱(250×4.6mm，5μm)上测量，洗脱剂：100％MeOH，安捷伦1100系统。

将化合物1(1.63g，6.59mmol)和KSCN(1.92g，19.8mmol)在100mL烧瓶中溶解于DMF(20mL)中。将混合物加热至65℃，直到所有起始物质都已溶解。添加在DMF(2mL)中的吡啶(886mg，12.35mmol)。将反应混合物冷却至4℃，并经10分钟逐滴添加在DMF(3mL)中的溴(1.219g，7.62mmol)(15:12)，从而导致一些沉淀。当HPLC指示完全转化为产物时，将混合物在4-10℃下搅拌1小时15分钟。使反应升温至室温，并添加5mL的15％Na

3.2

将化合物2(1.80g，5.91mmol)在DMF(16mL)中制成浆液，并在室温下逐滴添加2MNaOH(6mL，12mmol)。混合物在添加NaOH时变成红棕色，并使浆液溶解。加热至120℃(13:20)(3小时后的HPLC：100％转化为产物)。

处理：使混合物冷却至室温，并添加水(20mL)＝>轻微沉淀。通过添加浓HCl将反应混合物的pH调节至约pH 4-5。通过过滤收集固体，并用两份水(2×8mL)洗涤，并在60℃下在真空中干燥，得到1.687g(94％)的呈灰白色固体状的产物。

HPLC：约94％纯度

3.3制备7-氯-5-{[(1S)-1-苯基乙基]硫基}[1,3]噻唑并[4,5-d]嘧啶-2-胺(4)

在室温下向化合物3(1.82g，5.98mmol)在二噁烷(15mL)中的浆液中添加在二噁烷(2.5mL)中的DMF(962mg，13.2mmol)和在二噁烷(2.5mL)中的POCl

针对溶剂含量校正的产量：约5.065g(92％)。

将化合物4(1.852g，5.74mmol)、DIPEA(1.112g，8.61mmol)和D-亮氨醇(1.008g，8.61mmmol)溶解于NMP(12mL)中，并在120℃下将混合物在密封的派热克斯玻璃管(pyrextube)搅拌(始于：17:40)。

15.5小时之后的HPLC：约98％转化率

19.5小时之后的HPLC：>99％转化率

处理：将冰水倒入混合物中。最初形成固体，但是在添加结束时，所述固体塌陷为深棕色油状物。添加EtOAc(50mL)，并分离各相。用EtOAc(2×25mL)萃取水相，并用水(8mL)、饱和NaHCO

HPLC纯度：99.0％(碱性方法)；

97.4％(酸性方法)。

大量固体通过过滤器进入到滤液中。通过离心分离固体，并通过移液管去除上清液。用两份(约2×5mL)的MEK洗涤固体。在去除最后的上清液之后，在60℃下将产物在真空中干燥2.5天。产量(第2批)：324mg(12.8％)的呈盐酸盐形式的产物。

HPLC纯度：99.0％(碱性方法)；

97.5％(酸性方法)。

合并产量：1.548g(61.3％)

两个批次都含有约0.07％DMF(w/w)。DMF已存在于起始物质中。

在50mL圆底烧瓶中合并两个批次的化合物5(1.338g，3.041mmol)，并添加水(6mL)，之后添加2M NaOH(1.6mL，3.2mmol)。搅拌混合物，并添加EtOAc(40mL)。在搅拌期间添加额外的0.5mL(1mmol)2M NaOH。15分钟之后，所有固体都溶解，并分离各相。用pH条来测量水相的pH，＝＞pH＝7。向水相中添加更多的2M NaOH(0.4mL，0.8mmol)，使pH为10。用EtOAc(25mL)萃取水相并分离各相。合并的有机相经Na

最终产物的非对映异构体比率反映起始物质(化合物1)的对映异构体比率，其为99.7％(S)。

在氮气氛围下，在Ti＝20℃下将乙酸乙酯和(s)-苯基乙醇装入干燥的1380L玻璃衬里的反应器。将澄清至黄色的溶液在Ti＝20℃下保持30分钟，接着排放到200L聚乙烯内衬筒(poly lined drum)。在60分钟内向1380L玻璃内衬反应器中装入三聚氯化氰、乙酸乙酯(1.2)和N,N-二甲基甲酰胺。将溶液在25分钟内从Ti＝6.3℃加热到Ti＝25℃，接着在180分钟内冷却到Ti＝-5℃。通过使用1英寸隔膜泵，在最大Ti＝-0.4℃下在12小时内装入(s)-苯乙醇于乙酸乙酯中的预制溶液，接着在Ti＝-5℃下保持3小时。IPC样品指示(s)-苯乙醇＝0.35％(目标<1％)。在Ti＝-5℃下在120分钟内装入丙-2-醇并保持30分钟，装入硅藻土并接着在配备有50μm滤布的不锈钢纳氏过滤器(nutsche filter)上过滤，由于滤布堵塞而遇到的重大过滤问题，将物质分批地再装入具有50μm滤布以及硅藻土床的50L压力式过滤器。固体在分批过滤时用乙酸乙酯洗涤。将过滤液体再装入1380L容器，并且设定用于在最大Ti＝40.9℃和真空(vac)200mbar下蒸馏，从而去除750kg馏出物。将容器冷却到Ti<25℃，并在配备有50μm滤布和硅藻土床的50L压力式过滤器上分批过滤，用乙酸乙酯分批洗涤。将过滤液体再装入330L容器，并且设定用于在最大Ti＝35.1℃和真空24mbar下蒸馏，从而去除500kg馏出物。以浅黄色液体分离出275kg。

结果：

275kg未经校正：

GC纯度：73.87％(面积％)

GC手性纯度：94.9％(面积％，R异构体)。

在Ti＝20℃下在60分钟内将N,N-二甲基甲酰胺、氢氧化钠球粒和4-氨基-6-羟基-2-巯基嘧啶装入干燥的2800L玻璃内衬反应器，维持温度低于Ti＝25℃。在60分钟内加热到Ti＝62.5℃，并保持30分钟。在75分钟内装入(1R)-苯乙基氯，维持Ti＝60-65℃。使所述反应在Ti＝60-70℃下保持6小时。IPC样品指示4-氨基-6-羟基-2-巯基嘧啶＝<0.1％(目标<1％)。反应冷却至Ti<25℃，并装入水，在90分钟内使用32％氢氧化钠将pH调节至12.01。装入甲苯并保持30分钟，之后在3小时内使用配备有50μm滤布和硅藻土床的不锈钢纳氏过滤器过滤以去除相间固体。在再装入分离的滤液相以去除下部水相(1500L)之后，有机相以废料形式滞留。将水相装入1380L玻璃内衬反应器，并且设置用于在最高Ti＝61.3℃和真空180mbar下进行蒸馏，从而去除1800L馏出物。装入水，并且接着在90分钟内加热到Ti＝65.3℃。在180分钟内用6.2％盐酸将pH调节至pH 5.5。在180分钟内冷却至Ti<20℃，接着在10小时内在配备有50μm滤布的不锈钢纳氏过滤器上过滤。将所述滤布拉动干燥并置换洗涤，以分离湿润的灰白色固体588kg。

结果：

588kg未经校正(LOD含量30％w/w＝176.4Kg，产量(经校正)：48.1％)

HPLC纯度：81.26％(面积％)

HPLC手性纯度：95.03％(面积％S异构体)

在Ti＝20℃下将4-氨基-6-羟基-2-[(1S)-1-(苯乙基)硫代]嘧啶和甲醇装入干燥的2800L玻璃内衬反应器，在120分钟内加热至Ti＝55℃并保持1小时。通过在线式GAFF过滤器的方法，将溶液在Ti＝55℃下转移到4500L玻璃内衬容器中，在完成后通过甲醇洗涤管线。将热量施加至Ti＝65℃(回流)并保持1小时，并在3小时内装入水，维持Ti>60℃。减少搅拌，并在6小时内缓慢冷却至Ti＝22.5℃。在12小时内在配备有50μm滤布的不锈钢纳氏过滤器上过滤，将所述滤布拉动干燥并置换洗涤，经拉动干燥，以分离302kg的灰白色固体。

结果：

302kg未经校正

HPLC纯度：95.11％(面积％)

HPLC手性纯度：97.09％(面积％R异构体)(面积％S异构体)

在Ti＝20℃下将4-氨基-6-羟基-2-[(1S)-1-(苯乙基)硫代]嘧啶和甲醇装入干燥的4500L玻璃内衬反应器，在50分钟内加热至Ti＝65℃(回流)并且并且保持30分钟，并在3小时内装入水，维持Ti>60℃。减少搅拌，并在6小时内缓慢冷却至Ti＝23.1℃。在12小时内在配备有50μm滤布的不锈钢纳氏过滤器上过滤，将所述滤布拉动干燥并置换洗涤，经拉动干燥以分离142kg的灰白色固体。在锥式真空干燥器(Cone Vac Dryer)中于最高Ti＝60℃和20mbar下干燥。

结果：

106kg未经校正(LOD含量99.1％w/w＝105.1Kg，产量(经校正)：61.1％)

HPLC纯度：94.07％(面积％)

HPLC手性纯度：99.04％(面积％S异构体)

两个合成步骤和两次重结晶对于达到>99％的手性纯度来说是必要的。

所述方法的总产率为29.3％(包括重结晶步骤)。