一种L-氨基酸连接酶突变体、重组载体、重组菌及其应用

摘要

本发明公开了一种L‑氨基酸连接酶突变体、重组载体、重组菌及其应用。所述L‑氨基酸连接酶突变体是将如SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的第110位进行突变获得；或者将如SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的第108位、第110位同时进行突变获得。所述的L‑氨基酸连接酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID No.4和SEQ ID NO.5所示。一种采用所述的L‑氨基酸连接酶突变体编码基因构建的重组载体，含有该重组载体的基因工程菌表达的L‑氨基酸连接酶突变体在催化合成Ala‑Gln过程中其酶活比野生型BacD提高1.87倍，为232.45±17.4U·(mg·h)‑1；反应26h后，该突变体可以使释放的产物磷浓度达到694.47μM，相比于野生型BacD积累量571.95μM，提高了21.4％。通过计算，单位质量的双突变体NFLY的催化产物Ala‑Gln的产量可达2.59mM‑1·L‑1·mg‑1。