一种表达嗜热菌蛋白酶突变体的重组大肠杆菌及其应用

摘要

本发明公开了一种表达嗜热菌蛋白酶突变体的重组大肠杆菌及其应用，本发明使用大肠杆菌表达含嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus thermoproteolyticus)来源的嗜热菌蛋白酶Npr的突变体，突变体Npr‑115M2的全细胞催化体系酶活为17U/mL，较突变前提高了55％。后续利用大肠杆菌BL21表达Npr‑115M2，并进行全细胞转化合成阿斯巴甜前体苄氧羰基阿斯巴甜的温度优化，底物苄氧羰基天冬氨酸和苯丙氨酸甲酯在反应温度为34℃时的转化率为70％，最终得到的阿斯巴甜产率在95％以上。