一种基于新冠病毒特异性逆转录引物的建库方法及运用

摘要

本发明公开了一种基于新冠病毒特异性逆转录引物的建库方法，其步骤包括：1)基于新冠病毒一致性序列设计15条特异性逆转录引物；2)基于Tn5VR转座酶对新冠病毒建库测序。本发明另外还公开了该建库方法的运用。本发明针对新冠病毒的高保守区域设计特异性逆转录引物，选择性的逆转录新冠病毒的RNA，从而实现对病毒RNA的特异性富集，提高测序数据中病毒序列的占比。同时，本发明采用特异性的转座酶建库方法，该转座酶仅可切割DNA与RNA杂合链，并在切割位置添加接头序列，实现直接从DNA‑RNA杂合链起始的建库测序方法，可以避免存在的基因组DNA污染，同时可以将建库的起始量量降低至1ng以下，实现超微量的新冠病毒测序。