一种猪流行性腹泻病毒荧光LAMP引物组、试剂盒及检测方法

摘要

本发明提供了一种猪流行性腹泻病毒荧光LAMP引物组、试剂盒及其检测方法。所述猪流行性腹泻病毒荧光LAMP试剂盒包括2×反应液12.5μL，内引物FIP、BIP 40μmol/L各1.0μL,环引物LF、LB 20μmol/L各1.0μL，外引物F3、B3 5μmol/L各1.0μL，Bst DNA聚合酶0.8μL，逆转录酶0.2μL，荧光染料0.5μL。所述试剂盒的检测方法，包括步骤：1)提取病毒核酸模板；2)将荧光LAMP反应体系与2.0μL的病毒核酸模板混合，补水至25μL，并加入20.0μL的封闭液；3)通过Real‑Time PCR System设定保温阶段63℃30s，1个循环；循环阶段63℃15s，63℃45s，40个循环；于63℃45s处收集荧光信号。其猪流行性腹泻病毒荧光LAMP检测试剂盒反应时间比Taqman荧光PCR法可缩短20min以上。