一种酪氨酸磷酸化蛋白质定量分析方法

摘要

本发明涉及一种酪氨酸磷酸化蛋白质定量分析方法，该方法是以经过修饰的SH2超亲体为一抗，基于ELISA法，得到待测样品中酪氨酸磷酸化水平的动态变化曲线，检测过程中，以酪氨酸磷酸化标准蛋白为参照样品得到标准曲线，以标准曲线为参照，实现待测样品中酪氨酸磷酸化水平定量分析；该方法成本低、无需样品预富集、特异性好、检测限低。此外，ELISA法在孔板中进行，仪器简单。所采用的SH2超亲体可通过细菌表达、纯化得到大量结构稳定的蛋白，大大节约了实验成本，背景清楚，方便改造。其对酪氨酸磷酸化蛋白具有和抗体一样的高亲和高特异性且相对广谱的特点，成功实现对多个复杂样品的酪氨酸磷酸化水平定量分析。